聚赖氨酸作为化妆品防腐剂可行性分析(5)
2 材料与方法
2.1 材料
2.1.1 供试菌种
表2.1供试菌种
名称 型号 来源
大肠杆菌
黑曲霉
铜绿假单胞菌
金黄色葡萄球菌 A8739
A6404
A9027
A6538 微生物实验室保存
微生物实验室保存
微生物实验室保存
微生物实验室保存
2.1.2 培养基和主要试剂
表2.2 培养基和主要试剂
品名 试剂纯度 厂家
牛肉膏蛋白胨培养基 生化试剂 上海中科昆虫生物技术开发有限公司
平板计数琼脂 生化试剂 北京陆桥技术有限责任公司
马铃薯培养基 生化试剂 北京陆桥技术有限责任公司
卵磷脂吐温80营养琼脂 生化试剂 北京陆桥技术有限责任公司
聚赖氨酸
尼泊金甲酯
吐温－80
琼脂粉
葡萄糖
氯化钠
无水乙醇
牛肉膏
蛋白胨
麦芽浸出粉 >50%
食用级
化学纯
生化试剂
分析纯
分析纯
分析纯
生化试剂
生化试剂
生化试剂 实验室自制
食品工艺实验室提供
国药集团化学试剂有限公司
上海中科昆虫生物技术开发有限公司
国药集团化学试剂有限公司
国药集团化学试剂有限公司
国药集团化学试剂有限公司
北京陆桥技术有限责任公司
北京陆桥技术有限责任公司
北京陆桥技术有限责任公司
2.1.3 主要器材设备
表2.3主要器材设备
名称 规格 厂家
智能型恒温恒湿箱
移液枪
数字显示转速电动搅拌机
电子天平
超净工作台
全自动高压蒸汽灭菌
精密pH计
数显游标卡尺 LHS-250SC型
10-100、100-1000μL
200w/50Hz
MP200B型
SW-CJ-2FD型
SYQ-DSX-280型
FE-20型
0-150min 上海浦东荣丰科学仪器有限公司
大龙医疗设备上海有限公司
上海索映仪器设备有限公司
上海精科实业有限公司
上海博迅有限公司医疗设备厂
上海申安医疗器械厂
梅特勒-托利多(上海)有限公司
密测多友量仪苏州有限公司
2.2 方法
2.2.1供试菌样制备：
霉菌孢子悬浮液的制备：挑取适量经马铃薯培养基活化的黑曲霉孢子至无菌水中，经玻璃珠打散10min，制成菌落总数为106CFU/ml的孢子菌悬液，备用。
大肠杆菌，铜绿假单胞菌，金黄色葡萄球菌菌悬液的制备：挑取经牛肉膏蛋白胨琼脂培养基分离纯化后，形态相同的菌落4～5个，接种于液体培养基中37℃、培养16h后，稀释至菌落总数为106CFU/ml，备用。
2.2.2试剂制备
称取一定量的聚赖氨酸溶液，溶于蒸馏水中，配置成10g/L的母液，灭菌，备用。
称取一定量尼泊金甲酯，溶于无水乙醇中，配置成10g/L的母液，备用。
2.2.3 测试平皿制作
将溶化并冷却至50℃的培养基倒于灭菌平皿内，每个平皿约20mL，待琼脂凝固后，以100μL移液枪取供试菌的菌悬液0. 2 mL注入平皿内，再以灭菌的涂布棒迅速将菌液涂抹均匀，以上操作均在无菌室内进行。
2.2.4 滤纸片法测定防腐剂抑菌效果