抗植物病原真菌放线菌的筛选(2)
2.4化学筛选结果与分析 11
3讨论 12
致 谢 13
参考文献 13
引言
我国是一个地广人多的农业国家，农业安全生产关系着民生和国家的安全。随着科学技术的进步，中国在农业上取得了令人瞩目的惊喜成果，但仍然有很多的因素制约着农业长足发展。其中，植物病害就是致使农作物大量减产的重要因素之一，而在植物病害中大约有70%-80%的病害是由植物病原真菌引起的［1］，比如水稻纹枯病（Rhizoctonia solani Kühn）就是现今水稻常见的病害之一，该病会致使水稻抽穗减少，从而造成产量的大幅度减少。
目前，解决植物病害常用的方法是使用化学药剂。早期化学药剂的应用客观上促进了农业的发展，带来了巨大的经济效益。但随着化学农药的长期大量使用，其副作用越来越明显，产生了一系列令人担忧的问题，比如越来越多的致病菌产生了抗药性，导致原先有效的化学农药对其防治效果大大降低；同时化学农药大多含有剧毒且不易降解，这些有毒成分随着河流、湖泊散布，造成生态环境的破坏；更可怕的是这些有毒成分会随着食物链传递给人类，对人类的健康造成危害。所以，找到替代化学农药的防治植物病害的方法是现代农业发展所迫切需求的。
近些年，随着微生物学研究的进步，人类从微生物中找到了越来越多的生防菌并研制成农用抗生素用于农业植物致病菌的防治［2］。农用抗生素与化学药剂相比，具有无毒或低毒的特性，不会对非靶标生物造成危害；又因为农用抗生素的使用不会对周围环境产生破坏，所以其不会破坏生态系统的稳定；而且农用抗生素生产原料来源广，可再生，这为其在实际农业生产中的大规模应用创造了有利的条件。农用抗生素的这些优点使得利用抗生素制备新农药已经成为各国研发农药的新方向。研制农用抗生素外国起步较早且取得了一定的成就，但中国也在这方面奋起直追，比如中国科学家从链霉菌中分离出多效霉素，其对水稻纹枯病，烟草赤星病和梨黑斑病等病害有很强的抑制效果［3］。随后又成功研发了井岗霉素、农抗 120、中生菌素、武夷霉素和浏阳霉素等新抗生素，其中井岗霉素用于防治水稻纹枯病非常理想。这些成果的取得在一定程度上推动了农业病害生物防治的发展，但现有这些农用抗生素还远远不能满足农业生产的需要，因此，开发出更多的生物农业迫在眉睫。
放线菌能够产生数量庞大、种类繁多的生物活性物质［4］。据统计，微生物所产生的2万多种具有生物活性的代谢产物约有45%是由放线菌产生的［5］，其中最引人注目的活性物质是抗生素［6］，对许多其他微生物具有很强的抑制作用［7］。另外放线菌也能产生其他一些具有生物活性的物质，如酶及酶抑制剂、生物碱和氨基酸等［8］。放线菌的这些优点，使之成为人们筛选生防活性物质的热点之一［9，10］。张丽等[11]从印楝叶片中分离筛选出了娄彻氏链霉菌(S. rochei)，其是一种对稻瘟病菌具有显著防治作用的内生放线菌；张清明等[12]对苹果树腐烂病内生拮抗放线菌A-2进行了研究，结果表明：A-2发酵滤液对腐烂病菌的抑制率达90%以上,对其他9种常见的植物病原真菌也具有良好的拮抗作用，是优良的拮抗菌株。这些研究表明：从放线菌中筛选抗植物病原真菌的生防菌具有可行性和重大意义。
本文通过IPS2培养基、PDA培养基对四川攀枝花麻疯树内生菌和新疆土壤中的放线菌进行活化，之后以6种常见的植物致病真菌作为供试菌，通过平板对峙和发酵液抑菌相结合的方法快速筛选出具有抗菌活性的放线菌，最后进行化学筛选以挑选出拮抗性高、化学物质丰富的优良的放线菌菌株，为下一步生物农药的开发提供一些实验数据。