转基因大豆后代材料的SMV抗性检测(2)
繁毒：包括4种大豆花叶病毒株系：SC3、SC7、SC15、SC18。
接毒：将脱毒种子在隔离网室内采用盆栽试验，在对生真叶期采用人工汁液摩擦法分别接种对应病毒株系。采集毒源病叶，加入金刚砂少许，将叶片研磨成匀浆状，加入磷酸缓冲液，用毛刷摩擦接种，接种后用清水冲洗叶片表面残渣[5]。
外源基因HC-pro的17个T4代高抗家系接种以上4种病毒（每个品种4个家系接种SMV株系，Jack品种1个家系，仅接种SC3）。
分类情况如下所示：
外源基因HC-pro的转基因材料：
1-76-18-9-4 1-40号（SC3）41-82号（SC7）
1-76-18-9-10 1-30号（SC15）31-65号（SC18）
3-11-20-1-2 1-19号（SC3）
3-11-20-2-18 1-25号（SC7）26-50号（SC15）51-74号（SC18）
6-45-9-1-1 1-25号（SC15）26-52号（SC18）
6-45-9-1-11 1-30号（SC3）31-62号（SC7）
82-10-9-10-7 1-40号（SC3）41-84号（SC7）
82-10-9-10-25 1-35号（SC15）36-68号（SC18）
CK-3-23-1-2 1-10号（SC3）
1．2 方法
1．2．1 除草剂涂抹
将商用Basta（除草剂）原液用纯水稀释至200 mg/l，加入0.1% Tween-20（表面活性剂）并搅拌均匀。用毛笔蘸取除草剂稀释液，以上表面主叶脉为分界线涂抹植株的半片叶子，另半片叶子作为对照并用记号笔标记。3-5 d后观察叶片症状，如果除草剂涂抹过的半片叶子与对照相比没有发生明显变化，判定为除草剂阳性；如果除草剂涂抹过的半片叶子出现黄化和枯萎等药害症状，判定为除草剂阴性。除草剂抗性幼苗的处理叶与对照无明显差异，而非转基因植株和转基因阴性植株的叶片均出现了明显的药害症状
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