摘要矮牵牛是一种重要的观赏花卉植物，多倍体矮牵牛可以增加其观赏价值。本研究采用发 根农杆菌遗传转化和染色体人工加倍技术，成功诱导了矮牵牛毛状根，并进行了 PCR 分子鉴 定，进一步利用秋水仙素处理产生了多倍体毛状根。研究结果表明，选用 0。1%的秋水仙素、 处理时间为 24 h，既能达到染色体加倍的效果，同时也能保持毛状根较高的存活率。本研 究结果对利用加倍的毛状根，获得多倍体矮牵牛提供了技术基础。88024

Abstract Petunia hybrida is an important ornamental plant, and polyploid can be increased its value。 In the study, the hairy root was induced via Agrobacterium tumefaciens transformation first。 Then, the hairy root was identified by PCR reaction。 Moreover, polyploid hairy root was produced by colchicines treatment。 The results showed that 0。1% colchicines and 24 h treatment time was optimal, which could not only achieve chromosome doubling, but also maintain the high survival rate of hairy roots。 The results provide a technical basis for the chromosomes doubling of hairy root and developmentof polyploid。源-于,优W尔Y论L文.网wwW.youeRw.com 原文+QQ75201,8766

毕业论文关键词：矮牵牛；毛状根；染色体；加倍

Keywords:Petuniahybrid;hairyroots; chromosome; doubling

目录 

引言 。 4 

1材料与方法 。。 4 

1。1材料4 

1。2发根农杆菌 K599 的培养与活化4 

1。3 发根农杆菌 K599 侵染及毛状根的诱导培养 。。 4 

1。4 毛状根的 PCR 鉴定。 5 

1。5 秋水仙素处理毛状根 。 5 

1。6毛状根的倍性鉴定6 

2结果 。。 6 

2。1矮牵牛毛状根诱导与离体培养 。。 6 

2。2矮牵牛毛状根的 PCR 鉴定。。 7 

2。3 矮牵牛毛状根多倍体的诱导及其倍性鉴定 。 7 

3讨论 。 10 From~优E尔L论E文W网wWw.YoUeRw.com 加QQ7520.18766

参考文献 。。 11 

致谢 。 11 

引言

矮牵牛是属于茄科的重要花卉植物，花型美丽、花色丰富多彩，深受人们喜爱；同时它 也是研究植物生长发育的模式植物。多倍体的植株在根、茎、叶、花等器官上具有“巨大型

[1]”，矮牵牛作为重要的观赏性植物，对其进行多倍体诱导，可增强其观赏性价值，因而我

们可以利用秋水仙素诱导矮牵牛染色体加倍，从而培育矮牵牛的新品种。然而在利用秋水仙 素诱导矮牵牛染色体加倍的过程中，人们大多采用矮牵牛的种子[2]、叶片[3]、茎段、茎尖[4]、 愈伤组织[5]等进行多倍体诱导，很少见利用毛状根为原始材料进行矮牵牛多倍体诱导的研究 报道。 

毛状根（hairy root）是发根农杆菌侵染植物细胞，其 T-DNA 插入并整合到植物细胞 基因组 DNA 所诱导形成的不定根。通过毛状根的培养，不仅克服了植物生长缓慢、有效成 分积累有限的不足，且具有不依赖外源植物激素等优点。毛状根具有多方面的应用，在药用 方面，陈宇[6]等通过白英毛状根离体培养，可以高效率地获得薯蓣皂苷元。杜旭红[7]利用两 种丹参毛状根为材料，对毛状根的快速培养及其生物反应器进行初步的研究，对冠心病和心 绞痛等心血管疾病的预防和治疗有重要意义。在《龙葵毛状根诱导及其抑菌活性的研究》中， 王丽等[8]人得出龙葵毛状根对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和芽孢杆菌均有一定程度的抑制作 用，药用价值待进一步研究。除此之外药用植物还有太子参、三七、地黄、北细辛等在毛状 根诱导方面都有研究。可见毛状根在药用植物方面具有重要的作用，对其药用成分分析有重 要作用。毛状根也可直接用于外源基因功能的分析，它在一定的条件下可以再生植物，非常