嗜酸性氧化亚铁硫杆菌浸矿工艺研究(4)
XSP-BM-2CA 上海求精生化仪器有限公司
BM上光
2.2 分析方法
2.2.1 重铬酸钾滴定法测定嗜酸性硫酸亚铁硫杆菌金矿过程亚铁氧化率
（1）9mol/L硫酸溶液:500mL硫酸稀释至1000mL。
（2）15:85的磷酸溶液：150mL磷酸溶解于850mL水中。
（3）5g/L二苯胺磺酸钠：称取0.5g二苯胺磺酸指示剂，溶解于100mL水中加入1到2滴硫酸，摇匀，贮于棕色试剂瓶中。
（4）0.01667mol/L重铬酸钾溶液：称取4.904预先在140℃～150℃干燥2h，在干燥器中冷却至室温的重铬酸钾（基准）溶于水中，冷却至20℃后移至1000mL的容量瓶，用水稀释至刻度，摇匀。
（5）硫磷混酸：边搅拌边将200mL磷酸注入约500mL水中，再加300mL硫酸，混匀，流水冷却。用吸管吸取2mL静置待测清液，加入10mL硫磷混酸，在不断搅拌下，立即用0.001667mol/L的重铬酸钾溶液（K2Cr2O7）进行滴定，直至溶液由无色变成紫色为终点，读取并记下重铬酸钾的用量V。
溶液中铁离子浓度X（g/mL）按下式计算：
X=6×55.85×0.001C0V/2=0.1676C0V
式中：V — 滴定试液时消耗的重铬酸钾标准溶液的体积，mL
C0 — 重铬酸钾标准溶液的浓度，mol/L
铁离子浓度测定完后需换算成相应体积及质量下按下式计算焙烧产物中FeO含量Y：（%）：
Y1=（x×30/0.4）×100%
2.2.2 血球计数法测量菌体数目
摇瓶浸出实验过程中不定期的补加5mol/L硫酸，使各摇瓶pH值按设计文持恒定，同时采用血球计数法，不定期取样计算嗜酸性氧化亚铁硫杆菌数量，绘制细菌生长曲线，直至菌体数目稳定，实验结束。
2.2.2.1 操作步骤
（1）配置菌悬液：将样用单层纱布过滤，摇晃后用移液管取适量的样品至容量瓶中稀释（稀释情况依菌数量定。）
（2）镜检计数：将干净的血球计数板放置在显微镜下，视野内若有菌，重新清洗，直至完全清洁。
（3）制板：取干净的载玻片，放置血球计数板的中央，用胶头滴管轻轻的沿盖玻片边缘滴入（两侧均滴），放平，用吸水纸吸取边缘多余的菌液，静止约5min。
（4）计数：选取5个中方格（每个中方格内有16个小方格）计数，格线上的一般只数上方和右方的。
（5）清洗血球计数板,轻轻放置在酒精瓶中。
2.2.2.2 计算
每毫升细菌个数=50000×菌液稀释倍数×5个小方格中的细菌个数
每克细菌个数=50000×菌液定容体积×5个小方格中的细菌个数/菌重量/（干粉含水量）
2.2.3 原子吸收光谱法测定铜离子含量
(1）试剂和材料：
硝酸溶液（1:1）
硝酸溶液（1:499）
同标准溶液1：称取铜丝（高纯）1.000g，精确至0.0002g，放入200mL烧杯中，加入50.0mL水和1.0mL(1:1)硝酸溶液，在电炉上缓慢加热使铜丝完全溶解，赶尽氮的氧化物，冷却后（1:499）硝酸溶液稀释至1000mL容量瓶中，摇匀，此溶液1.00mL含1.00mg铜。
铜标准溶液2：移取铜标准溶液1 5.0mL，放入100mL容量瓶中，用（1:499）硝酸溶液稀释至刻度，此溶液1.00mL含0.050mg铜。
(2）仪器和设备
原子吸收光谱仪和一般实验室用仪器。
原子吸收光谱仪，应配有铜空心阴极灯，空气-乙炔预混合燃烧器，背景扣除校正器。
(3）工作条件的选择
按照仪器说明书所提示的最佳条件调节波长324.7mm，调试灯电流、通带、积分时间、火焰条件、背景扣除等，仪器开机点火后需稳定5至10min方能进行测定。