紫苏醛对黑曲霉细胞周期和细胞凋亡的影响(2)
Key words: Perillaldehyde; A. niger; Cell cycle; Apoptosis
目录
引言 4
1 材料与方法 5
1.1供试材料 5
1.1.1实验原料 5
1.1.2实验试剂 5
1.1.3实验仪器 6
1.1.4实验试剂的配置 7
1.1.5培养基的配置 8
1.2实验方法 8
1.2.1制备黑曲霉斜面 9
1.2.2黑曲霉孢子悬液的制取 8
1.2.3紫苏醛对黑曲霉细胞膜中甾醇含量的影响 8
1.2.4紫苏醛对黑曲霉细胞周期的影响 9
1.2.5紫苏醛对黑曲霉细胞凋亡的影响 9
2 结果与分析 9
2.1不同浓度的紫苏醛对黑曲霉细胞膜中甾醇含量的影响 9
2.2不同浓度紫苏醛对黑曲霉细胞周期的影响 10
2.3不同浓度紫苏醛对黑曲霉细胞凋亡的影响 13
3 讨论 15
4 致谢 16
参考文献 16
引言
紫苏醛(Perillaldehyde)，又名二氢枯茗醛，外观呈无色或是浅黄色液体状，散发紫苏香气的单萜类化合物[1]。紫苏醛是紫苏挥发油的一种成分。紫苏挥发油，是紫苏的香气成分通过蒸馏冷凝之后获得的混合物，常存在于紫苏茎、叶和花之中，主要含有紫苏醛、柠檬烯等，其中紫苏醛的含量最高[2]。很多研究表明紫苏挥发油中的紫苏醛有很好的抗菌防腐性。我国的研究者徐振在1947年发现紫苏叶能阻制葡萄球菌生成[3]。1987年,日本的学者Honda等[4]研究发现紫苏挥发油中的紫苏醛、柠檬醛具有抗真菌作用。美国科学家Raphael Kang等[5]研究发现紫苏的水蒸气提取物(主要成分紫苏醛)具有中等广谱抗菌活性，并与水寥中的寥二醛协同抗菌，抑菌效果良好。而且一些研究表明紫苏醛不但能有抑菌杀菌的作用而且还不会产生抗药性[6]，因此在医学农学方面意义重大。在日益发展的社会下，人们对生活质量，对食品安全的关注度越来越高，因此紫苏醛这样对人体危害较少的物质，并且具有药用价值的物质成为研究热点，受到许多研究者的关注。
黑曲霉(A. niger)是一类广泛存在于自然界的丝状致病真菌[7]。黑曲霉菌丛呈黑褐色，其菌丝发达，具有多分枝且多核的特点。黑曲霉多存在于营养含量丰富的食品当中，而在潮湿，高温的条件下黑曲霉极易引起食品的霉变，霉变产生的黄曲霉毒素等对人体的伤害比较大。因此，为防止食品腐烂，延长保存时间，人们借用物理，化学的方式进行保存，但天然抑菌剂因具有低毒和高效的特点而更受到人们的青睐[8]。
细胞周期(Cell cycle)是指细胞从一次分裂完成开始到下一次分裂结束所经历的全过程，分为间期与分裂期。细胞周期的过程DNA发生复制，是细胞生命延续的过程。因此如果需要将其生命停止，即可阻滞其细胞周期过程。研究表明不同类型的细胞其细胞周期的差别主要在G0期，而G1期、S期、G2期和M期则相对稳定。根据生理条件的差异，G0期的短则几天长则更有可能达到几个月甚至几年，不进行分裂或极少分裂的细胞一般停止在G0期[9]。当然细胞周期的调控受很多机制的影响控制，比如周期素和CDK抑制蛋白对CDKs的调节[10]。细胞周期受各项指标影响，很多阻滞细胞周期正常运转的物质，广泛运用于防腐或是肿瘤治疗，具有很大的研究意义。目前对细胞周期的研究一般运用流式细胞术(flow cytometry，FCM)，该方法在临床和科学研究方面运用广泛，目前很多不同类型的染料用于检测细胞周期，其中比较常用的染料是碘化丙啶(propidium iodide，PI)[11]。