双酚A对豆科作物幼苗地上器官生长的影响(3)
2.3.2土培大豆幼苗
每个品种的大豆准备15个一次性纸盒，每个纸盒中添加相同质量的营养土0.25kg，同样，每三个为一组，每组中的三个重复添加等量的双酚A作为处理，五个组分别以土中双酚A浓度为0、10、20、50、75mg/kg的比例添加双酚A，混匀，选取长势良好一致的发芽种子于营养土中培养，每纸盒中种植15株，随机排列于温室中，每天用蒸馏水浇灌，第15天时取样测定指标。
2.4 幼苗相关指标的测定
2.4.1幼苗指标的选择
选取株高、叶面积、叶绿素含量、光合速率、鲜重、干重作为实验测定的指标。
2.4.2幼苗指标测定
第15天选取有代表性的幼苗测株高、叶面积、叶绿素含量、光合速率、鲜重、干重。其中株高用细线、直尺测定。大豆叶子比较平展但叶形不规则，所以用叶型纸称重法测定[7]来测大豆幼苗的叶面积，其测量计算方法如下：
（1）剪1dm2的硫酸纸，用分析天平准确称重，计算纸重面积系数a值（cm²/g）
（2）将叶片平铺硫酸纸上，用铅笔沿叶片边缘准确地画出叶形，剪叶形纸并准确称叶形纸重w（g）
（3）计算叶面积（S）：S=a×W= cm2•g-1×g= cm2
参照《植物生理学试验原理与技术》中提到的叶绿素含量的常规测定方法来测定，因为叶绿素a、b在95%乙醇中最大吸收峰的波长分别为665 nm和649 nm，所以利用分光光度计在这一特定波长下测定其光密度，即利用公式：Ca=13.9D665-6.88D649
Cb=24.69D649-7.32D665
计算出提取液中各色素的含量[8]。
光合速率用光合速率测定仪直接测量。鲜重则是采集下来之后，用蒸馏水洗净表面污物并用吸水纸擦干其表面水分，然后直接用电子天平测量，干重是将植株在鼓风干燥箱中以80℃干燥24h后取出称量。