摘要：灵芝是一类含有生物活性次生代谢产物的高等担子菌。近年来随着全基因组测序的完成、转基因体系的建立、反向遗传操作体系的完善以及自身特有的次生代谢方式，灵芝日渐成为潜在的模式担子菌。热胁迫和氧化胁迫是灵芝生长过程中较为常见的逆境形式，热胁迫和氧化胁迫都会阻碍灵芝菌丝的正常生长，引起灵芝内的灵芝三萜含量升高，在此实验中，我们选择NaHS作为外源的H₂S的供体，通过添加不同浓度的NaHS来研究H₂S对灵芝面对逆境有着怎样的作用，以灵芝体内的灵芝三萜含量反应灵芝面对逆境时的受影响程度，灵芝三萜含量越高，灵芝因为逆境受到的影响越大，灵芝三萜含量与对照组越接近说明受到的影响越小。43581

硫化氢是近年发现的一种新型的气体信号分子，在微生物中具有抗氧化，抗凋亡，提高细胞活性，对抗不利环境的作用。但是过高浓度的硫化氢会对微生物造成不利影响，阻碍微生物的生长，在实验安排中，我们先测定灵芝的硫化氢致死浓度，实验思路就是加入不同浓度的硫化氢，观察在哪个浓度出现生长抑制现象，该浓度就是硫化氢的致死浓度，为了尽可能的是该浓度接近真实致死浓度，在实验中，我分别设置了ck、10、50、100、200这5个浓度梯度，最后发现灵芝在加入200umol/LNaHS后生长明显受阻，所以致死浓度在100-200umol/L之间。

热胁迫和氧化胁迫是微生物生长发育过程中常见的环境胁迫因子，在此次实验中，我们主要研究硫化氢在这两种胁迫中的调控作用。首先研究硫化氢在对抗热胁迫中的作用，在菌落直径实验中，实验组在加入100umol/LNaHS后进行热激，我们发现与对照组相比，实验组的菌落直径明显大于对照组，硫化氢能够缓解热胁迫对灵芝的影响；再进行三萜的测定，在热激之前加入NaHS的为实验组，在热激之后加入相同浓度的为对照组，我们发现热激会引起灵芝三萜含量的升高，而添加硫化氢能降低三萜含量，相当于能够缓解热胁迫造成的不利影响。

接下来我们研究了硫化氢在对抗氧化胁迫中的作用，在加入H₂O₂后直接加入NaHS的是实验组，在收样之前加入相同浓度NaHS的是对照组，我们发现氧化胁迫与热胁迫一样会引起灵芝三萜含量的升高，而实验组的三萜含量明显低于对照组的含量，说明硫化氢能够对抗氧化胁迫的不利影响。

毕业论文关键词：灵芝，灵芝三萜，硫化氢 ,热胁迫，氧化胁迫

In response to different environmental stimuli, the affect of hydrogen sulfide in the ganoderma 

Author:Bao Xiaorong   Tutor:Zhao Mingwen

Abstract：Ganoderma is a class of high basidiomycetes that contain bioactive secondary metabolites. In recent years, with the completion of whole genome sequencing, to establish the system of genetically modified (gm), reverse genetic operation system of perfect and its own unique way of secondary metabolism, ganoderma lucidum has become a potential mode basidiomycete fungi. Thermal stress and oxidative stress is the more common forms of adversity in the process of growth of ganoderma lucidum, thermal stress and oxidative stress will hinder the growth of ganoderma lucidum mycelia normal, cause in the g ganoderma lucidum triterpenoid content increases, in this experiment, we chose the NaHS as exogenous H₂S donor, by adding different concentrations of NaHS to study the role of H₂S in the face of adversity, with the content of ganoderma lucidum triterpenes responses in ganoderma lucidum in the face of adversity, affected the higher the content of ganoderma lucidum triterpenes, ganoderma lucidum because adversity is, the greater the ganoderma lucidum triterpenoid content and the control group, the more close to illustrate the impact on the smaller.