徒手切片是指徒手使用锋利的刀片将新鲜的已经被固定的组织或者实验材料切成很薄的片状物的方法,在进行徒手切片之前,我们植物组织要进行解离等操作,其中解离是至关重要的一步,解离时间过短会导致细胞之间连接组织无法完全除去,这样会使得植物细胞部分重叠在一起,完全无法顺利进行后续的观察实验;如果解离时间过长,解离液对植物细胞产生危害作用,又会导致细胞酥软烂掉,细胞死亡,更加无法观察细胞分裂等行为。因此如何把握解离时间是一个非常值得研究的课题,而且根据查找的资料的显示,国内外尚无有关学者对具体的解离时间做出研究,因此本文的选题较为新颖,同时,本论文为如何研究解离时间奠定基础,由于徒手切片在日常大学生物教学和研究中的广泛运用,本文的相关结论也能为广大师生在解离操作时提供建议和依据,为相关研究提供参考,因此具有重要的研究意义。

2. 大蒜根尖细胞的有丝分裂[6,7]

     大蒜根尖细胞属于真核细胞,所以大蒜根尖细胞在细胞增殖分裂的时候进行的是有丝分裂。下面从理论上介绍有丝分裂。有丝分裂(mitosis)是真核细胞将其细胞核中染色体分配到两个子核之中的过程。将母细胞基因组平均分配到两个子细胞中,基因组由特定数目染色体组成。因为子细胞是母细胞的复制体,在有丝分裂前母细胞必须复制自己的所有染色体。细胞核分裂后通常伴随着细胞质分裂,将细胞质、细胞器与细胞膜等细胞结构匀等分配至子细胞中。植物根尖组织细胞有丝分裂过程具有高度的复杂性和规律性。有丝分裂的整个过程发生的事件可以被分为几个互相前后联系的时期。这些阶段分别为间期、前期、前中期、中期、后期、末期。

间期:有丝分裂间期仅占细胞周期的一小部分,与更长的间期交替发生。细胞在间期中为细胞分裂做准备,故不是有丝分裂期的一部分。间期又分为G1期、S期和G2期。在这三个子分期中,细胞合成蛋白质、复制细胞器。染色体仅在S期合成。因此,细胞在G1期生长,在S期复制染色体,在G2期准备进行有丝分裂。最后在M期分裂并重新开始新一轮细胞周期。

前期:在高度液泡化的植物细胞中,细胞核必须在有丝分裂开始前移动至细胞中央。植物细胞通过形成成膜粒来分隔大液泡。成膜粒是一层由细胞质形成的横板,其能沿细胞未来分裂的方向将细胞分为两部分。核中遗传物质通常为松散线性染色质,染色质开始浓缩为结构高度有序的染色体。由于遗传物质已在S期复制,折叠后的染色体具有一对姐妹染色单体,两染色单体之间以着丝粒相连。此时染色体一般在高倍光学显微镜下可见。在细胞核附近有一对中心粒组成中心体,中心体是微管组织中心。细胞在有丝分裂开始时具有两个中心体,在细胞分裂后分别分配至两个子细胞中。两中心体通过组装可溶性微管蛋白使微管形成纺锤体。分子马达蛋白稍后将两中心体沿微管拉至细胞两极。虽然中心粒可以帮助微管组装,但由于植物不具备中心粒且有丝分裂不一定需要中心体,中心体对纺锤体形成并不重要。

前中期:在大多数多细胞生物中进行开放式有丝分裂,此过程中核膜解体,微管进入核空间。真菌和部分原生生物如藻类或滴虫则进行封闭式有丝分裂。这些细胞或可在核内形成纺锤体,或其微管可穿透完整核膜。每个染色体在中心体处形成两个动粒,每个动粒连接一个染色单体。动粒具有复杂的环状蛋白质结构以供微管连接染色体。虽然动粒的结构和功能尚未被完全理解,但目前发现动粒包含分子马达结构。当微管接触到动粒之后,分子马达从ATP水解中获得能量以“爬”上连接中心体的微管。动粒的分子马达活动与微管组装与分裂为分离染色体提供了必要的能量。

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