复合菌肥在黄瓜上施肥方法研究(2)
1 材料和方法
1.1 材料
黄瓜品种：新津优1号，自购。
光合细菌菌株：实验采用2种光合细菌菌株AR12、AR13是从周口师范学院校园清水河水中经富集、分离和纯化获得，分别为沼泽红假单胞菌（Rhodopseudomonas palustris）、深红红螺菌(Rhodospirilum rubrum）。
光合细菌的准备：将在冰箱内保存的菌种取出，用接种环挑取菌落至灭菌的光合细菌固体培养基表面进行菌种活化，经30℃温箱培养5天后，加少量无菌水将菌苔洗下来制成菌悬液，用平板涂布法进行扩大培养，每菌株涂布10平皿，30℃温箱培养3天后，加等量无菌水将菌苔洗下来制成菌悬液，2种菌按1:1的比例复配成光合细菌复合菌剂，菌液浓度为5.93×107CFU•mL-1。
小麦秸秆发酵：称取两份秸秆，每份70g，分别倒入300mL菌液和300mL清水于30℃温箱中发酵至有明显的臭，分别为肥料1，肥料2。
1.2 试验设计
选用均匀饱满的种子，用0.1%HgC12表面消毒8min，无菌水反复冲洗，分别在水中、复合菌液中浸泡24h，然后在28℃温箱中催芽，测定发芽率。挑出用水中浸泡的发芽一致的种子，种在装有培养土或培养土和肥料的纸杯中，每杯播种5株黄瓜，黄瓜种植直至出苗后，分别采用浇灌法、叶面喷湿法、菌液发酵秸秆法分别处理。浇灌法每5天浇灌1次复合菌肥，每次灌溉量12.5mL/杯，共灌溉3次；叶面喷湿法从第10天开始喷复合菌肥，一天喷湿3次，共喷施300mL菌液；菌液发酵秸秆法采用肥料1和培养土混合栽种黄瓜；设置菌液发酵秸秆法的对照组清水发酵秸秆法，采用肥料2和培养土混合栽种黄瓜。每个处理共8杯，3个重复，清水灌溉为总对照。在黄瓜幼苗期(播种后第18天)测定黄瓜形态指标，并取黄瓜植株同位叶的叶片测定生理生化指标。
1.3 仪器和设备
HH-S型水浴锅 巩义市英峪予华仪器厂
Spectrumlab22PC分光光度计 上海棱光技术有限公司
HPX-9162 MBE 不锈钢电热培养箱 上海博讯实业有限公司医疗设备厂
GZX-9240 MBE电热恒温鼓风干燥箱 上海博讯实业有限公司医疗设备厂
SW-CJ-2FD洁净工作台 上海博讯实业有限公司医疗设备厂
AL204电子天平 梅特勒—托利多仪器（上海）有限公司
LDZX-40KBS型立式电热压力蒸汽灭菌锅 上海申安医疗器械厂
荣声BCDR23冰箱 广东省顺德市荣贵区荣贵路
TG16台式高速离心机 湖南仪器仪表总厂离心机厂
1.4 黄瓜幼苗生长及生理生化指标的测定
株高采用直接测量法测定[15]；叶面积采用格点法测定[15]。叶绿素含量采用分光光度计法测定[15]；根系活力采用氯化三苯基四氮唑（TTC）法测定[15]；过氧化物酶（POD）活力采用愈创木酚比色法测定[15]；超氧化物歧化酶（SOD）活力采用连苯三酚自氧化法测定[15]。
1.4.1 黄瓜生长指标的测定
株高采用直接测量法测定[15]；叶面积采用格点法测定[15]。
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