浮游植物叶绿素a测定方法的比较分析(2)
3.4 单色法、三色法测定Chla浓度的结果比较 8
3.5 叶绿素a测定的误差探讨 9
3.6 本研究的缺陷与不足 10
4 结论 10
4.1 7种方法对Chla提取效果的比较 10
4.2 抽滤操作和离心操作对浮游植物Chla含量测定结果比较 10
4.3 单色法、三色法测定Chla浓度的结果比较 10
参考文献 11
致谢 11
叶绿素是浮游植物光合作用的主要色素，含量最多的是叶绿素a（chlorophyll-a，以下简称Chla）。Chla普遍存在于所有的浮游植物中，大约占有机物干重的1-2%，是目前反映浮游植物初级生产力水平、估算浮游植物生物量的最常用的功能指标之一。叶绿素a的含量也是描述水体营养状态的重要结构指标之一[1]。
目前，Chla含量的测定有现场仪器测定和实验室内测定两种。现场仪器测定常利用海洋多波段扫描仪航空遥感直接测定海面叶绿素浓度。由于此方法不需要使用溶剂提取色素这一步骤，因此大大缩短了测量时间，但准确度和精密度较差。因此，现实仪器测定法多用在准确度和精密度要求不高的大面积海域快速测定。
Chla的实验室提取方法主要有机溶剂提取法、吸附树脂提取法、超临界二氧化碳提取法、超声波提取法、微波提取法。在这些提取方法中，有机溶剂提取法是最为普遍使用的提取方法。有机溶剂提取法提取Chla的方式又有许多种，超声提取分光光度法、热乙醇法、丙酮加热法、反复冻融法、热丙酮法、延时提取法和丙酮加热—超声提取分光光度法7种方法较为常见。目前，Chla的实验室内测定方法有分光光度法、荧光光度法、高效液相色谱法三种[2]。分光光度法测定的灵敏度高、所需仪器设备简单，操作简便。分光光度法得到广泛使用。荧光光度法又有同步荧光法和导数荧光法之分。同步荧光法联合导数技术之后，峰形更突出，在测定低浓度物质时，更有利于将弱信号从复杂背景中区分出来。荧光法有测定水体中叶绿素a的灵敏度较好、精确度较好、准确度较好以及简便快捷的优点，但是因为其测定结果受非光合作用的影响大、参数多的缺点而未得到广泛的应用。高效液相色谱法能将多种色素和色素衍生物从混合的浮游藻类种群中分离，但由于此项技术专业性太强因而也没有被广泛应用。分光光度法又分为单色法和三色法，但是很少有文献提及后续测定的两种方法的具体情况。国内在该研究领域，采用的是《水和废水监测分析方法》（第四版 增补版）推荐的丙酮研磨法[3]作为Chla的常规监测方法。此方法以90%丙酮作为溶剂研磨提取Chla。但该方法存在耗时长、提取不完全、步骤繁琐、误差大等缺点。因此已有文献报道提出了从不同角度对丙酮研磨法进行了优化改进。比如说可以通过改变细胞破碎的方式、提取时间的改变、提取液温度的增加、选用不同的提取溶剂等方式。