抗疲劳食品和药物的开发必须以充分认识疲劳的发生机制为前提。前期研究提出许多假说对该机制进行解释，如代谢物堵塞（乳酸等）、能源耗竭（糖类等）、氧化应激（自由基增多等）等[4-7]。

银杏叶，是银杏科植物银杏的叶，又名白果叶。现代科学研究证明：银杏叶含有200多种药用成分，其中黄酮类活性物质46种，微量元素25种，氨基酸8种[8]。银杏叶中VC、VE、胡萝卜素及钙、磷、硼、硒等矿物元素含量也十分丰富，超过一般水果蔬菜及可食植物原料。在银杏叶中含有两类抗氧化剂--营养性抗氧化剂及非营养性抗氧化剂[9]。前者主要有胡萝卜素、VC、VE、硒、锌、铜等,后者主要有银杏黄酮、萜内酯、儿茶素、多酚类等，含量也十分丰富，它们在保护机体不受自由基所致的氧化损伤方面具有十分重要的作用。因此，我们推测银杏叶提取物对小鼠具有一定的抗疲劳作用。

鉴于此，本研究尝试以银杏叶提取物作为研究对象，通过小鼠实验，观察其是否具有抗疲劳功效，以期为抗疲劳食品与药物的开发提供科学依据。

1 材料和方法

1.1实验动物

雄性小鼠  健康，游泳能力正常   由周口师范学院神经生物学与转化医学研究所提供。

1.2材料与试剂

银杏叶提取物片（市售），每片含有银杏叶提取物40mg，其中银杏黄酮苷9.6mg，萜类内脂2.4mg。丙二醛（MDA）试剂盒、血尿素氮（BUN）试剂盒于南京建成生物工程研究所购置；

标准葡萄糖液（0.05mg/ml）、蒽酮试剂、浓硫酸、冰醋酸、吐温80、无水乙醇等由周口师范学院神经生物学与转化医学研究所提供。  

1.3仪器与设备

HWS12型电热恒温水浴锅         上海恒科学仪器有限公司；

XK96-A快速混匀器               江苏新康医疗器械有限公司；

电子天平AR224CN               上海奥豪斯仪器有限公司；

723可见光分光光度计            上海元析仪器有限公司；

台式低速离心机                  中国江苏金坛市医疗仪器厂；

微量移液管、玻璃试管等由周口师范学院神经生物学与转化医学研究所提供。

1.4 实验方法

1.4.1小鼠的饲养与分组

将12只雄性小鼠按体重随机分成处理组和对照组，每组6只，3只/笼，并打上耳号。对小鼠采用常规饲养，在23℃左右室温下源!自`优尔~文)论(文]网[www.youerw.com，相对湿度为55%左右时，让其自由摄取水及饲料。将小鼠按体重随机分成处理组和对照组，每组6只，并打上耳号。

处理前，测定小鼠日水量，结合小鼠体重，将银杏叶提取物片研磨成粉末状，溶于蒸馏水中，加入少量的吐温80（起帮助溶解的作用），根据64.8mg/day/kg（小鼠体重）标准，配制一定浓度的银杏叶提取物液，对处理组小鼠进行每天喂食。对照组饮水中不加银杏叶提取物片，正常饮食。

1.4.2小鼠血清和组织的分离与提取

小鼠喂养处理期间给小鼠在含有温度为25℃的容器中进行2次适应性游泳，4周后，在小鼠的尾部绑上小鼠体重5%的负重物的情况下对小鼠进行一次性竭力游泳实验，小鼠力竭标准为小鼠头部淹没水中8秒不能自主浮出，记录力竭游泳时间。然后挖眼球取血，从血液中分离到的血清。立即对小鼠解剖，并取出肝脏组织，肌肉组织，用0.9%NaCl溶液洗去附着的血液并用滤纸吸干。置于液氮中临时保存，后置于-70℃冰箱中保存备用。