2 材料和方法源'自:优尔:"论-文'网www.youerw.com
2.1 植物材料与试剂
本实验以马铃薯栽培品种Desiree的无菌苗为植物材料,取苗龄3周的生长状态良好的无菌苗茎段为转化的受体材料。
实验所用卡那霉素(Kanamycine,Kan)购于荷兰Sigma公司,头孢霉素(Cefotaxime ,Cefo)购于Amresco公司,乙酰丁香酮(Acetosyringone ,AS)购于BBI公司,所用玉米素(ZT)、赤霉素(GA3)、2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)和6-苄基嘌呤(6-BA)为中国医药集团上海化学试剂有限公司产品。其他试剂均为分析纯。
2.2 菌株与质粒
根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)菌株EHA105,含植物表达载体pBIN19/glgB-SBD重组质粒(由本实验室构建)。pBIN19/glgB-SBD质粒上主要携带大肠杆菌淀粉分支酶基因(glgB-SBD)和选择标记基因卡那霉素(Kan)抗性基因nptⅡ。
2.3 主要仪器
低速离心机,水浴锅,剪刀,PCR仪,移液枪,干燥箱,电泳仪,凝胶成像系统等。
2.4 培养基
农杆菌菌液培养选用LB培养基,马铃薯遗传转化涉及的培养基