摘 要：从健康桃树枝中分离纯化内生菌，研究桃树内生菌是否产生与桃树自身代谢相同的产物。PDA培养基分离纯化桃树内生菌，优化得出了从桃树中分离内生菌的消毒条件，此条件下分离得到5种内生菌，通过高效液相色谱法对桃树提取出的代谢产物和纯化得到内生菌发酵代谢产物进行对比分析，得出其中4株内生菌产生的部分代谢产物可能与桃树自身代谢产物相同。54249

毕业论文关键词：桃树，内生菌，分离，高效液相色谱，代谢产物

 Abstract: The endophytic were isolated from health of peach. The disinfection condition of separation from peach endophyte are optimized. In this study，5 entophytes were isolate by tissue separation method from peach. The isolated endophytic fermentation metabolites and peach extracts were analyzed by high performance liquid chromatography，and that found about 4 entophytes may produce the similar metabolites as the host plant.

Keywords：peach，endophyte，separation，HPLC，metabolites 

目录

1  前言 5

2  材料与方法 5

2.1 材料与试剂 5

2.1.1 实验材料 5

2.1.2 培养基 5

2.2  主要设备仪器 6

2.3  实验方法 6

2.3.1  桃树内生菌的分离、纯化及保存 6

2.3.2  内生菌发酵液及植物提取物的制备 6

2.3.3  HPLC分析条件 7

3  结果与分析 7

3.1  桃树内生菌分离消毒条件的建立 7

3.2  内生菌的分离、纯化及保存 7

3.3  内生菌的特征 7

3.4  桃树提取物的高效液相色谱分析条件的确定 9

3.3 发酵液高效液相色谱分析 10

结  论 12

参考文献 13

致  谢 14

1  前言

桃树作为落叶小乔木的一种,原产于中国，卵形至披针形叶片，宽约3厘米，长7-14厘米，叶基拥有蜜腺，细齿边沿，暗绿色光泽；暗灰色树皮跟着年齿的增加而出现许些裂纹；花单生，白色或粉红色，初春吐花；果实呈现球形，毛茸茸的表皮，食用水果，橙红色，直径7.5厘米，有一个深坑和凹槽的核，有白色种子。桃树的栽培最早能够追溯到周朝，《诗经·国风·周南》中有《桃夭》一诗，渐渐流转至亚洲周边区域，西方从波斯引入，桃的拉丁名 Persica 便是波斯。作为植物的果实桃也是一种水果，多汁，花可以观赏，可以生产罐头食品、制桃脯或者生吃等，核仁亦可食。本草纲目里面对成熟的桃干有过很细致的介绍，桃子晒干又叫碧桃干，对于溢汗和止血有一定的疗效。桃树的根和干切成片，大家通常称作桃根或桃头，主要针对黄疸、腹痛、胃热起效。桃树花治水肿、便秘。桃叶广泛治疗窜气行血、煎水洗风湿、皮肤病、汗泡湿疹。桃树的嫩果晒成干称为碧桃，碧桃主治吐血、心痛、妊妇下血还有小儿虚汗［1］。

植物内生菌是一个具有丰富多样性的微生物种群，主要分布于未感染症状的健康植物组织和器官内，跟寄主植物协同进化［2］。基于某些内生菌产生与共生植物相同或者相似的代谢产物的特点，这些内生菌数量庞大，物种丰富，已近成为新医（农）药活动物质的潜在资源［3］。还有些研究则表明，目前从植物体内内生菌中分离出活性物质，大约有51%新化合物，都没有经过详细的报道和研究。最早报道的一种内生真菌是从短叶红紫杉(Taxus brevifolia)中分离的出来的，在1993年Stierle等人［4］首次提出报道，这是一种能够生产紫杉醇的内生菌，此后植物内生菌成为国内外微生物研究的热点。