高速逆流色谱分离野马追化合物的条件的研究

摘要：应用高速逆流色谱法分离制备野马追中的萜类化合物。以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水（3：5：3：3，V/V）为两相溶剂系统，用上相作为固定相，下相作为流动相，在主机转速为900r/min、流动相转速为2.0mL/min、检测波长为254nm条件下进行分离制备。对所收集的峰用高效液相色谱进行纯度检测，对纯度较高的2种化合物(按出峰次序标为1、2)进行结构鉴定，化合物1为3β-Hydroxy-8β-[4'-hydroxytigloyloxy]-costunolide，化合物2为eupalinolide A，其纯度为78.44%和77.72%。57494

毕业论文关键词：野马追，高速逆流色谱，高效液相色谱，萜类化合物，分离

Abstract: Terpenoids from Eupatorium lind-leyanum were separated by high-speed countercurrent chromatography. The separation was performed using a two-phase solvent system composed of n-hexane, ethyl acetate, methanol and water (3:5:3:3, V/V) at a ﬂow rate of 2.0 mL/min, and rotation speed and detection wavelength were set at 900r/min and 254nm, respectively. The lower phase was used as the mobile phase and the upper was used as the stationary phase in the head totail elution mode. Two terpenoids were detected by HPLC. The purities of peaks 1 and 2 were 78.44% and 77.72%, respectively. Their structures were characterized as 3β-Hydroxy-8β-[4'-hydroxytigloyloxy]-costunolide and eupalinolide A by ESI-MS and NMR.

Keywords: Eupatorium lindleanumDC, high-speed countercurrent chromatography (HSCCC), HPLC, terpenoids, separation and purification

1 前言 3

2 材料与方法 4

2.1 材料 4

2.2 主要设备和仪器 4

2.3 野马追萃取物的制备 5

2.4 两相溶剂的选择 5

2.5 溶剂体系的制备和样品溶液的配置 5

2.6 HSCCC分离制备方法 5

2.7 HSCCC分析测定 6

3 结果与讨论 6

3.1 HSCCC溶剂体系的选择 6

3.2 HSCCC分离纯化结果 6

3.3 结构鉴定 7

结论 9

参考文献 10

致谢 11

1 前言

高速逆流色谱是（HSCCC）是一种由美国科学家Ito博士在1982年研究发明的[1]，能快速实现液-液分离制备的色谱技术。早期的逆流色谱装置是封闭型的，主要用于蛋白质和燃料的分离。后期经Ito博士的研究开发，创新的在螺旋管柱中引入流通机制，使其能够连续的分离制备样品。高速逆流色谱是一种以流体动力学平衡为基础的[2]，具有单向性和逆流性的色谱分离技术，利用螺旋管在高速旋转下产生的离心力，两相溶剂体系在高速旋转的螺旋管内不断进行混合、静置，以其中一相作为固定相，另一相作为流动相，使溶剂体系达到一种特殊的单向性流体动力学平衡，组分在旋转螺旋管内依据相对移动而互不混溶的两相溶剂间分配不同而获得分离，后按分配系数的大小次序，分子量大的先洗脱，分子量小的被包裹在凝胶颗粒中最后被洗脱出来。其设计原理图如图1[3]所示。