在农药的微生物降解研究中,应重视微生物对农药的降解过程,利用微生物对农药的降解应用于被污染的环境是消除农药污染的一个有效方法。微生物在农药转化中的作用:共代谢作用有些合成的化合物不能被微生物降解,但若有另一种可供碳源和能源的辅助基质存在时,它们则可被部分降解,这个作用称为共代谢作用。由于共代谢作用而推动的顽固性人工合成化合物的降解一般进行的较慢,而且降解程度很有限,参与共代谢作用的微生物不能从中获得碳源和能源,但是还是广泛存在着大量的具有共代谢功能的微生物,它们可以降解多种类型的化合物。矿化作用有许多化学农药是天然化合物的类似物,某些微生物具有降解它们的酶系。它们可以作为微生物的营养源而被微生物分解利用,生成无机物、二氧化碳和水。矿化作用是最理想的降解方式,因为农药被完全降解成无毒的无机物[4-5]。
微生物降解农药的问题主要有以下几方面。1)单一菌株的纯培养问题、2)环境条件对微生物降解农药的影响(如环境的温度、营养物质、pH、氧含量等,而自然环境中这些因素变化很大,这直接影响到微生物对农药的降解。如何克服环境的影响从而充分发挥目标微生物的作用是需要解决的重大问题)3)微生物降解目标化合物对降解的影响、4)微生物与被降解物接触的难易程度。5)微生物的适应性问题:所接种的微生物能否适应污染的环境,这不仅包括上述提到的物理环境,还涉及到生物之间的关系。接种到环境中的微生物受到抑制物的影响,或者受到包括捕食者在内的土著微生物的影响,甚至受到拮抗作用而不能生长等,这些都可以造成接种的微生物不能成为优势菌从而失去对农药的降解作用。微生物降解农药, 具有稳定性和抗污染性强的优点。很多研究已经证明,在农药污染的一些环境中人为的接种降解农药的微生物,那么是否可以采取一些条件控制措施,人为地接种微生物,这值得进一步探讨和研究[6-9]。
炔螨特( Propargite):化学名称: 2-(4-特丁基苯氧基)-环已基丙-2-炔基亚硫酸酯,分子式:C19H26O4S 分子量:350.47,又称克螨特,丙炔螨特 propargite; comite,是一种 广谱有机硫杀螨剂,它除了具有触杀和胃毒作用以外,还具有较强的渗透作用,且杀虫速效,对成螨和若螨有特效[ 10-11],可用于防治蔬菜、苹果、柑桔、茶等作物各种害螨,对多数天敌安全,有关炔嫡特的残留检测方法国内已有气相和液相色谱检测技术报道,Smith和VipinI}umar等人报道了炔嫡特在油桃叶、苹果、茶叶和土壤中的消解动态,邢月华等报道过克嫡特在葡萄上残留动态分析lAl。 为了科学评价炔螨特在使用后的残留降解行为和环境安全性,本研究炔螨特降解菌株,采用液相色谱法测定了该菌对炔螨特的降解,并对其生长特性进行了初步研究,旨在为微生物降解炔螨特,消除环境中炔螨特残留提供微生物菌株资源,为安全使用炔螨特保驾护航[12-13]。
2、 材料与方法
2.1、供试菌株和试剂
杀虫剂炔螨特(含量70%)
Pseudomonas sp.
2.2、实验器材
显微镜、PCR扩增仪、电泳仪、移液枪、分光光度计等
2.3 、培养基
LB培养基:NaCl 10.0g;蛋白胨 10.0g;酵母粉 5.0g;去离子水 1000ml;pH 7.0~7.2。
无碳培养基(g/L):NaCl 1.00,K2HPO4 1.50,KH2PO4 0.50,NH4NO3 1.00,MgSO4•7H2O 0.20,去离子水1000mL。
无氮培养基(g/L):葡萄糖 1.00,NaCl 1.00,K2HPO4 1.50,KH2PO4 0.50,MgSO4•7H2O 0.20,去离子水1000mL。