3.3萄糖醛酸内酯的制备 3
3.3.1蝌蚪培养 3
3.3.2 PX2+葡萄糖醛酸内酯溶液培养蝌蚪 3
4 行为学测试 4
5 实验结果 5
5.1存活率 5
5.1.1 不同浓度的PX培养蝌蚪后蝌蚪的存活率的统计学差异分析 5
5.1.2 不同浓度的葡萄糖醛酸内酯+PX2培养蝌蚪后蝌蚪的存活率的统计学差异分析 6
5.2 畸变率 6
5.2.1 不同浓度的PX培养蝌蚪后蝌蚪的畸变率的统计学差异分析 6
5.2.2不同浓度的葡萄糖醛酸内酯+PX2培养蝌蚪后蝌蚪的畸变率的统计学差异分析 7
5.3 行为学 8
5.3.1 不同浓度的PX培养蝌蚪后蝌蚪的行为学测试结果 8
5.3.2 不同浓度的葡萄糖醛酸内酯+PX2培养蝌蚪后蝌蚪的行为学测试结果 9
6 结论 11
参考文献 13
1 引言
随着科学技术的发展,人们的生活水平日益提升,人们对环境污染等问题也越来越关注。据世界卫生组织统计报道,地球上人类的80%的疾病都与环境污染有着密切的关系[8]。环境污染问题已经成为了人类生存和发展非常重视的话题。对二甲苯是苯的衍生物,是重要的化工原料。目前中国对对二甲苯的需求日益剧增,已经被广泛应用于加工生产涤纶纤维、轮胎工业、塑料合金、农药、化工农业等其他工业中。但是对二甲苯是一种无色透明液体,具有芳香气。PX的比重为0.861,熔点为13.2℃,沸点138.5℃,能与乙醇、乙醚、丙酮等有机溶剂混溶。且是可燃性物质,低毒化合物,毒性略高于乙醇,其蒸气与空气可形成爆炸性混合物,爆炸极限1.1%~7.0%,同时对呼吸道及眼睛都有刺激作用。因此可以看出对二甲苯在我们的日常生活存在着一定的生活隐患。目前,有人用斑马鱼做研究得出的结论是:当对二甲苯的浓度达到一定数值时,就会引起鱼类或其他水生生物发生中毒反应,浓度高时甚至死亡[1]。虽然对二甲苯已经被公认为是一种有毒的化合物,但其对动物和人类的毒性作用还尚不明确,尤其是对人和动物的的健康和生长发育的影响还有待研究和发现。因此,本次研究主要运用非洲爪蟾的蝌蚪作为模式生物,通过观察非洲爪蟾发育过程中PX对蝌蚪生长发育、存活率、畸变率以及在视觉行为学上逃避反应的影响,研究PX作为污染物对动物早期生长发育的毒性作用,探讨其引发蝌蚪畸变及大脑发育影响的作用机制。
因为非洲爪蟾具有代表性,易于饲养和 繁殖,世代周期短,子代多,遗传背景清楚,易于遗传操作,其蝌蚪以及成体均生活在水中,可以很容易的吸收水体中外源性激素或其他化合物等特点[2] 。从20世纪50年代以来,非洲爪蟾已经在各个领域中成为了重要的模式生物。如:发育生物学、胚胎学、细胞生物学和功能基因组学等
行为学研究动物个体和动物社群为适应内外环境变化(刺激)所做出的反应:如蝌蚪对光点刺激的视觉逃避反应。目前也有实验研究:给蝌蚪一个刺激(光点)观察蝌蚪的游泳方式,证明蝌蚪能够迅速的改变其游泳轨迹[4]。利用其改变游泳轨迹的次数来计算出蝌蚪对刺激的逃避率,来证明PX对蝌蚪的生长发育及视觉神经的发育是否有影响。因此在本实验研究中主要使用这个方法。