基因工程菌产精氨酸酶的提取(2)
1.3 精氨酸酶的生产以及工程菌 精氨酸酶的生产以及工程菌 精氨酸酶的生产以及工程菌 精氨酸酶的生产以及工程菌1.3.1 传统的生产方法精氨酸酶的存在十分广泛，理论上可以用微生物发酵的方法来提取，但是工艺过于复杂以及生产成本太高 ， 并且从微生物发酵中提取出的精氨酸酶作为药物应用于人体时可能会存在很大的抗性。目前市场中精氨酸酶大部分都来源于动物脏器，但是近年来由于动物体内一些病原微生物的存在 ， 使得从动物体内提取的精氨酸酶在应用于人体时产生了极大的限制。我国在 1965 年成功用化学合成的方法合成了人胰岛素，开创了蛋白质化学合成的新时代 。 但是酶的化学合成对于作为单体底物的各类氨基酸的纯度有着很高的要求，并且化学合成的成本高昂，所以化学合成的方法不适合生产精氨酸酶 。由于上述方法的种种限制，基因工程菌为精氨酸酶的生产提供了一条新的方法。1.3.2 基因工程菌近些年来基因工程在各方面都有着重大的突破，各国都尝试用基因工程菌来表达一些重要的基因 ， 比如人胰岛素 ， 干扰素 ， 肿瘤坏死因子等等 。 由于来源的蛋白质不同 ， 所需要的表达体系也不同 ， 目前有大肠杆菌 ， 酵母等四种外源基因表达体系 。 其中大肠杆菌表达系统有着高产量 ， 低成本 ， 短周期 ， 遗传背景清楚 ，技术成熟等优点。当使用大肠杆菌作为表达系统时，大肠杆菌内高水平表达的外源蛋白有的时候会以不溶解 ， 没有活性的包涵形式存在 。 到目前为止 ， 包涵体中高活性的外源蛋白回收率低，大部分的外源蛋白在复性的过程中丢失或者无法恢复活性 。包涵体，即 在某些生长条件下，大肠杆菌 内 积累 的 某种特殊的生物大分子 ，它们致密地集聚在细胞内，或 被膜 包裹或形成无膜裸露结构， 具有 水不溶性 。