试剂：红细胞、白细胞和血小板稀释液；5%柠檬酸钠溶液；0.1mol/L盐酸溶液。

   血液：从体质状况正常的家兔耳朵静脉获取的新鲜血液。

   器材：血细胞计数板、显微镜、手术刀片、移液枪（100µl、1000µl）、一次性定量毛细取血管（10µl、20µl）、移液管（1ml、2ml、5ml）、滴管、小试管、一次性刺血针、75%酒精棉球、血红蛋白计、10ml量筒、电子天平、离心机、离心管。

2.2  实验方法文献综述

2.2.1  试剂的配置

    (1).红细胞稀释液（Hayem稀释液）

    NaCl   （维持渗透压）                                     0.5g

    Na2SO4  (使溶液比重增加，红细胞均匀分布，不易下沉         2.5g

    HgCl2   （固定红细胞并防腐）                              0.25g

    蒸馏水                                                    加至100ml

    (2).白细胞稀释液

    冰醋酸            （破坏红细胞）                          2.0ml

    1%龙胆紫或1%美蓝（染白细胞核呈淡蓝色，以便识别）          1ml      

    蒸馏水                                                    加至100ml                                                 

    (3).血小板稀释液（许汝和氏含尿素稀释液）

    尿素      （维持渗透压）                                  10~13g

    柠檬酸钠   （防止血小板凝集）                             0.5g

    40%甲醛溶液（防腐）                                       0.1ml

    蒸馏水                                                    加至100ml

   （注意：先将尿素、柠檬酸钠溶于蒸馏水中，然后再加甲醛溶液。）[2]

    (4).家兔血液的获取

    将兔置于固定架,在靠近兔耳根部外缘静脉处剪去长约2cm的耳毛，用75%酒精将兔耳静脉处擦净，右手持注射针头,离耳根部约2cm处，从耳根向耳尖方向插入耳静脉约1cm左右，然后将针头（血管外部分)在进针口轻轻向上撬一下，使刺破的耳静脉血管的创口略有扩大，拔出针头，即可见出血快速流出。然后开始收集血液。血液收集完后，用干棉花球由耳尖向耳根方向擦拭创口，并用手指稍加压以止血。之后再需取血时，重复以上过程。来.自/优尔论|文-网www.youerw.com/

2.2.2  血细胞的计数

   （1）红细胞：

用5ml移液管吸取3.98ml红细胞稀释液放入1号小试管中，再用100µl移液枪吸取20µl的新鲜家兔血液，将其加入试管中。轻轻摇动试管约2分钟，即可将所获得的悬液用于红细胞的计数。取干净的计数板，置于以准备好的显微镜载物台上，盖上盖玻片，使两侧各空出少许。摇匀血细胞悬液，用滴管吸取，将滴管尖轻轻置于盖玻片边缘外，让滴出的血细胞悬液凭毛细管作用吸入计数室内，刚好充满计数室为宜。静置2min后计数，用低倍镜巡视计数室内被计数的特定血细胞分布是否均匀，分布均匀者方可计数，否则抛弃重新准备计数板。计数时先认清计数室位置。采用“由上至下，由左至右，顺序如弓”的顺序，对压边线细胞采取“数上不数下，数左不数右”的原则。依次计数并记录５个中方格中的红细胞数目并记录数据。红细胞数据处理方法：红细胞数/mm3=5个中方格中所数得的红细胞数×104。