15

2.6 16S rDNA测序结果 16

2.7系统进化树的构建 18

2.8 最适pH的测定 20

2.9最适温度的测定 22

3 结论 24

参考文献 26

致谢 27

图清单

图序号 图名称 页码

图2-1 A菌的菌落形态

图2-2 B菌的菌落形态

图2-3 A菌株革兰氏染

图2-4 B菌株革兰氏染色形态

图2-5 菌株A和B PCR扩增16S rDNA电泳结果

图2-6 凝胶纯化16S rDNA结果确认

图2-7 A菌株的系统进化树

图2-8 B菌株的系统进化树

图2-9 pH值对A菌株生长的影响

 图2-10 pH值对B菌株生长的影响

 图2-11 温度对A菌株生长的影响

 图2-11 温度对B菌株生长的影响

表清单

表序号 表名称 页码

表1-1 使用仪器名称目录

表1-2 PCR反应条件

表2-1 菌株分离方法和结果

绪论

自然界存在许多强酸环境,如废煤堆及其排出水、酸性温泉、废铜矿、硫矿、金属硫化矿酸性矿水、生物沥滤堆、含硫的酸性土壤以及其它人为酸性环境[1],还有火山口、火山湖、深海沉积物等[2],许多微生物的代谢活动也会产生酸性环境。嗜酸微生物主要生长在酸性环境,有资料将嗜酸微生物定义“生长在酸性环境中的微生物被称为嗜酸微生物”,这个定义并不是十分准确。查阅相关资料发现,有关嗜酸微生物的定义不尽相同,不过,一般是指可以在在相当酸性培养条件下能生长繁殖的微生物。

嗜酸微生物种类非常丰富, 目前通过分离筛选和分子生物学技术发现的嗜酸微生物至少有13个属、3个种[3] [4] 。嗜酸微生物可以分为两大类群:有许多微生物能在强酸环境中生长或生存,但是它们最适生长pH值在4-9之间,称这些微生物为抗酸微生物或耐酸微生物;还有一些微生物必须在pH值小于或等于3的环境中才能生长,称这些微生物为专性嗜酸微生物或极端嗜酸菌。也有根据嗜酸菌生长的 pH 值上限不同,将其分为极端嗜酸型、嗜酸型和耐酸型[5]。

嗜酸微生物具有较高的生物多样性,在系统发育分类中的细菌域、古菌域和真核域中都有分布。根据系统分类学可划分为细菌和古菌;根据营养类型可划分为严格自养微生物、异养微生物和兼性自养微生物(混合营养生长微生物);根据是否需要O2可以划分为好氧生长和厌氧生长;根据最适生长温度可划分为常温微生物( 30-35 )中度嗜热微生物(40-50 )极端嗜热微生物(65-80 )[6] 。根据能源代谢特点和生理生化复杂多样的性质还可以进一步细致划分,在此不再赘述。文献综述

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