表2-1测定SOD活性所需各溶液的用量

试管编号 1对照（不光照） 2对照（光照） 3 4

PBS(mL pH7.8) 3.5 3.5 3.5 3.5

氮蓝四唑(mL) 0.5 0.5 0.5 0.5

甲硫氨酸(mL) 0.5 0.5 0.5 0.5

蒸馏水(mL) 0.5 0.5 0.3 0.3

EDTA-Na2(mL) 0.5 0.5 0.5 0.5

酶液(mL) 0 0 0.2 0.2

核黄素(mL) 0.5 0.5 0.5 0.5

测定结果 0 调零

2.3.4 过氧化物酶（POD）活性的测定方法

POD活性的测定采用愈创木酚法测定[7]，以每克鲜重每分钟OD470值变化（上升）0.01表示酶活性大小，单位为U/g.minFW。

方法如下：

（1）制备反应混合液：取100ml PBS(0.2M，pH6.0)加入0.076ml愈创木酚（原液），加热搅拌溶解，冷却后加入0.056ml 30％H2O2，摇匀后冷藏备用。

（2）活性测定：取1cm光程比色皿2支，一支加入2.5ml反应混合液和30μl酶液，另一支加2.5ml反应混合液和30μlPBS（不加酶液）为对照调零，而后立即测定OD470值，每隔1min记录1次吸光度值，共记录5次。然后以每分钟内OD470变化(上升)0.01为1个酶活性单位（U）。来!自~优尔论-文|网www.youerw.com

    （3）测定完成后根据公式计算结果:

                          (1-4)

2.3.5 过氧化氢酶（CAT）活性的测定方法

CAT活性的测定采用H2O2紫外分解法测定[8]，以每分钟OD240值（下降）0.01表示酶活性大小，结果以U/g.minFW表示。方法如下：

(1)取10ml试管4支，其中1支作为调零，1支为对照管，2支为样品测定管。按表2-2加入各试剂。

    (2)S0号管在沸水浴中煮1min使酶液失活，冷却。再将所有试管预热至25℃后，然后逐管加入0.6ml 0.1mol/L的H2O2。每加完1管立即记时，并迅速倒入1cm光程比色皿中，测定OD240，每隔1min读数1次，共记录5次。