2.4 降解菌的形态特征观察
将分离纯化后的菌株在LB固体培养基划线后,置于30度恒温培养箱培养24h以后,观察菌落形态,大小,颜色及表面特征等。
在进行电子显微镜观察前处理依下述方法进行:将分离纯化后的菌体挑入含有10ml LB液体培养基的摇瓶中,震荡培养12h。培养后吸取800μL菌液离心,1500rpm离心3min,去上清液,加入500μL氯化钠溶液洗3次。2%戊二醛500μL, 4℃下固定1h,洗3次。4%戊二醛1ml, 4℃条件下静置过夜,同样洗3次。乙醇梯度脱水,梯度依次为 20%、50%、80%、100%,各脱水10min,1500rpm离心3min。 来!自~优尔论-文|网www.youerw.com
电子显微镜放大 6000 倍后观察菌株形态。
2.5降解菌株的最适生长条件的测定
2.5.1 最适氯化钠浓度的测定
将菌株活化培养24 h后按1%的接种量接种于LB液体培养基,共做五组氯化钠浓度变量处理,分别为1%,3%,5%,7%,9%,在30℃、180 r/min pH=7, 通气量为100ml下恒温振荡培养24h。取样后应用分光光度计测定每一组在200~400 nm 下的吸光值。
2.5.2 最适pH值的测定
用1mol/L HCl或NaOH调整LB培养基的初始PH, 使培养基的初始pH分别为4.0、5.0、6.0、7.0、8.0、9.0、10.0, 每个处理接种量为1%, 接种后在30℃下180r/min,氯化钠浓度为1%,通气量为100ml的条件下振荡培养24h, 取样后后应用分光光度计测定每一组在200~400 nm下的吸光值。