本课题拟研究不同浓度NO供体硝普钠（SNP）处理对菜豆叶绿素、Vc、可溶性固形物（TSS）、蛋白质、有机酸等品质指标含量变化的影响，为有效延缓菜豆采后贮存期间品质下降和延长保鲜期提供理论与实践参考。

1 材料与方法

1.1 试验材料

从淮安市菜市场上购买新鲜菜豆，选择大小、色泽和成熟度基本一致，无损伤、无腐烂的菜豆作为试验材料。

1.2 试验设计与处理

1.2.1 试验设计

项目 SNP浓度(μmol/L) 处理时间（h）

CK         0（清水） 2

Treat 1 50 2

Treat 2 100 2

Treat 3 200 2

1.2.2 试验处理

将四组质量均等菜豆分别浸泡在2L蒸馏水、50μmol/LSNP溶液、100μmol/L SNP溶液、200μmol/LSNP溶液2h，自然风干后装入保鲜袋中，每个处理分别设置3个重复（500g/重复），在20℃恒温箱中保藏。每隔3天对菜豆叶绿素、Vc、可溶性固形物（TSS）、蛋白质、有机酸等一系列品质指标含量变化进行测定。

1.3 检测指标与方法

1.3.1 叶绿素含量的测定

采用分光光度计法测定叶绿素含量[11]。取新鲜菜豆，擦净组织表面污物，捣碎，混匀。称取剪碎的新鲜样品0.5g，共3份，分别放入研钵中，加少量石英砂和碳酸钙粉及2～3ml95％乙醇，研成均浆，再加乙醇10ml，继续研磨至组织变白。静置3～5min。取滤纸1张，置漏斗中，用乙醇湿润，沿玻棒把提取液倒入漏斗中，过滤到100ml容量瓶中，用少量乙醇冲洗研钵、研棒及残渣数次，最后连同残渣一起倒入漏斗中。用滴管吸取乙醇，将滤纸上的叶绿体色素全部洗入容量瓶中。直至滤纸和残渣中无绿色为止。最后用乙醇定容至100ml，摇匀。把叶绿体色素提取液倒入光径1cm的比色杯内。以95％乙醇为空白，在波长665nm、649nm下测定吸光度。来`自^优尔论*文-网www.youerw.com

结果计算：将测定得到的吸光值代入下面的式子：Ca=13.95A665－6.88A649；Cb=24.96A649－7.32A665。据此即可得到叶绿素a和叶绿素b的浓度（Ca、Cb：mg/L），二者之和为总叶绿素的浓度。最后根据下式可进一步求出植物组织中叶绿素的含量：

叶绿素的含量（mg/100g）= [叶绿素的浓度×提取液体积×稀释倍数]/[样品鲜重（或干重）*100]。

1.3.2 有机酸含量的测定

用指示剂法测定菜豆中有机酸含量[12]。称取新鲜菜豆5g，至于研钵中迅速研成糊状，用50mL蒸馏水洗入250mL三角瓶中，加适量蒸馏水，于80℃恒温水浴中浸提30min，其间不断搅拌。冷却后6000r/min离心10~15min，上清液用蒸馏水定容到100mL（如材料为匀浆处理，且溶液色泽不影响滴定终点判断，亦可不离心冷却后直接定容到100mL）。或过滤，残渣用10~15mL蒸馏水冲洗2~3次，合并滤液，定容至100mL。取试液3份，每份25mL，分别置250mL三角瓶中，各滴入酚酞指示剂2~3滴。用NaOH标准溶液滴定至溶液呈微红色，30秒不褪色，即为终点。记录NaOH的用量。