摘要：通过对低pH条件下小麦氮代谢途径的关键基因的变化进行研究，分析低pH对小麦氮代谢基因表达差异的影响。通过实时荧光定量PCR实验，我们发现：与正常培养条件相比，在酸性条件下，硝酸盐转运蛋白基因（NRT)、谷氨酰胺合成酶基因（GS）以及谷胱甘肽硫转移酶基因（GST）有明显表达，且表达水平有明显差异。此外，通过蛋白分析，关键基因对应的关键蛋白表达量有显著改变，进一步证实了基因表达的分析结果。这对于帮助我们提高植物氮素利用能力，环境保护和作物增产都具有重要的现实意义。70574

毕业论文关键词：低pH，氮代谢，硝酸盐转运蛋白基因，谷氨酰胺合成酶基因，谷胱甘肽硫转移酶基因

Abstract：Based on the changes of the key genes of the nitrogen metabolism pathway of wheat under low pH condition, the effects of low pH on the expression of nitrogen metabolism genes were analyzed.By real-time fluorescence quantitative PCR experiments, we found that: with the normal culture conditions compared to under acidic conditions, nitrate salt transport protein gene (NRT), glutamine synthetase gene (GS) and glutathione s transfer enzymes (GST) gene was expressed in and expression levels were significantly different. In addition, through the analysis of the protein, the corresponding key protein expression of key genes have a significant change, which further confirmed the results of the analysis of gene expression. It has important practical significance to help us to improve the ability of plant nitrogen utilization, environmental protection and crop production.

Keywords：low pH, nitrogen metabolism, nitrate transporter gene, glutamine synthetase gene, glutathione s transferase gene 

目录

1  前言 3

1.1  土壤酸化 3

1.1.1  土壤酸化的概念及原因 3

1.1.2  土壤酸化的危害 3

1.2  氮素对植物的影响 3

1.3  植物氮代谢 4

1.3.1  氮代谢概念 4

1.3.2  氮代谢途径 4

1.4  氮代谢关键基因 4

2  材料与方法 5

2.1  材料的培养与处理 5

2.2  仪器与药品 5

2.2.1  主要仪器设备 5

2.2.2  主要药品 5

2.3  RNA提取 6

2.4  实时荧光定量PCR 6

2.5  SDS-PAGE 和western-blot分析 7

3  结果与讨论 7

3.1  低pH条件对小麦的影响 7

3.2  cDNA电泳条带验证 7

3.3  溶解曲线的变化 8

3.4  氮代谢关键基因的表达情况 8

3.5  氮代谢关键蛋白表达情况 10

结  论 12

参考文献 13

致 谢 14

1  前言

1.1  土壤酸化

1.1.1  土壤酸化的概念及原因

土壤酸化是指土壤经过外界因素的影响，接受过量氢离子或铝离子，导致碱性离子流失，土壤pH值降低，酸性增强，形成酸性土壤，是一种比较常见的自然现象。