三叶青的提取物中含有多种药用活性成分[12]，根据研究报道，从三叶青块根提取物中已经分离出数十种化合物，包括：山奈酚、山奈酚-3-O-新橙皮糖苷、山奈酚-7-O-β-L-吡喃鼠李糖-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、槲皮素和β-谷甾醇、麦角甾醇、蒲公英萜酮、蒲公英萜醇等[13-17]。现代药理研究表明，三叶青提取物——黄酮类化合物具有较强的抗肿瘤活性，能有效抑制肿瘤细胞增殖，促进肿瘤细胞凋亡。

三叶青主要分布于我国的浙江、湖南、江苏、江西、广东、广西、湖北、四川、贵州、云南、西藏等地。广泛生于山坡、山谷、河边、溪边的树林以及岩石缝中，海拔分布约为300-1300米，因为其产地的不同，三叶青的形状、药性也存在着一些差异[18, 19]。三叶青按其藤颜色分可分为青藤和紫藤，广西地区产主要为青藤金线吊葫芦，江西、浙江等地区为紫藤金线吊葫芦，从药性、品质方面而言，以浙江地区产地的三叶青为佳。目前主要利用性状鉴别、显微鉴定和理化鉴别等方式来对不同产地的药材进行鉴定[20, 21]。

染色体是生物遗传物质的主要载体，是细胞核中最稳定和重要的成分，其决定着物种的遗传特性。植物的染色体数目是染色体的基本特征，对研究植物系统演化、物种间的亲缘关系、起源与进化，相近植物种属的鉴别分类，远缘杂交及遗传工程中的染色体鉴别等均具重要意义[22]。根据文献资料，目前对三叶青的研究主要集中在对其植物学特征、化学成分、毒理药理学研究、临床应用、人工栽培、组培快繁和次生代谢物生产等方面，尚未见对三叶青的染色体核型观察和分析的研究报道。文献综述

三叶青作为一种民间抗肿瘤药物，具有药用和观赏两大特性。一方面作为纯中药材大规模地开发和生产，另一方面还可以人工栽种美化环境、供人赏玩。而近年来，随着人们对其的了解深化，市场上对三叶青的需求量也呈现一种不断上升的状态，价格已从2005年的150元/千克飞涨至600～800元/千克，采用人工手段去培育三叶青不太容易，而野生资源更是出现了严重的滥采滥挖的现象。由于人为的过度采挖，三叶青物种资源正处于一种濒危的状态。为此，本研究选择浙江不同地区产的三叶青，进行染色体核型观察和分析，不仅完善了三叶青的细胞学特征，更是进一步为其细胞学形态结构与其生长发育和药理之间的相关性研究提供基础，为开发利用三叶青和鉴定其种质资源、合理栽培、优选优育提供进一步研究的依据。

1。 材料与方法

1。1 实验材料

生物材料：三叶青的苗分别购买自浙江省丽水（浙江南部地区）、金华（浙江中部地区）和杭州市富阳区（浙江北部地区）三个不同的产地，适量取材后将其种植在温室大棚中使其继续繁育，实验时剪取适量的不定根根尖。每个不同产地的品种至少观察统计5个细胞以上的数据。

实验试剂：卡诺氏固定液（无水乙醇：冰醋酸=3:1，现配），0。05%浓度的秋水仙素溶液，1 mol/L的盐酸，45%冰醋酸，无水乙醇，亚硫酸水溶液，混合酶液（纤维素酶、果胶酶各1%～2%），石碳酸—品红染色液去离子水，蒸馏水。

实验仪器：水浴锅，酒精灯，指型瓶，烧杯，载玻片，盖玻片，橡皮，镊子，解剖针，刀片，吸水纸，胶头滴管，显微镜。

1。2 实验方法

根据参考文献[23]中的方法，稍作改进。具体方法如下。

1。2。1 取材

将生长在大棚中的三叶青实生苗，剪取适量根尖，用自来水漂洗附着在根上的土，进行压片观察；或者取15～30 cm长的实生苗的枝条，放入1/2 MS培养基中水培，剪取水培生长出的根进行压片观察。取材时应选取长度较短，形状饱满的根，剪取1cm。。取材时间为上午7-12时之间选取整点进行取样。