1。4 微生物法合成β-苯乙醇

利用微生物法来合成β-苯乙醇早已成为国内外生产的一种趋势，因为微生物在合成主产物的β-苯乙醇的同时，伴有例如苯乙醛等的副产物产生，也是相当重要的一种天然香料。现研究阶段，能够合成β-苯乙醇的微生物主要还是采用酵母菌，但是也存在着例如本课题所发现的原核细菌，其同样可以达到酵母菌产目标产物的作用。

利用生物技术来合成β-苯乙醇较为常用的技术是通过与菌体生长有所关联的生物催化法，主要使用的途径就是Ehrlich途径，而在微生物生产β-苯乙醇时，β-苯乙醇在浓度较高时由于细胞会产生产物抑制作用而使目标产物的产量降低[7]，据文献报道，当β-苯乙醇的浓度达到2。5g/L的时候会抑制将近75%的酵母菌生长，Seward和Stark等人利用不同的酿酒酵母菌株分批发酵产β-苯乙醇，使其目标产物浓度最高达到2。6g/L[8]。可见由于副产物乙醇和目标产物β-苯乙醇具有协同抑制效应使主产物产量大大降低，基本只能维持在3g/L左右，想要解除β-苯乙醇对于微生物细胞生长的抑制作用有两种方法：第一是利用原位产物分离技术（简称：ISPR），可以将我们所需要的目标产物实时的被分离出来，第二则是选用对于β-苯乙醇耐受性较高的菌株来提高其产物的产量，利用紫外诱变来获得合适的菌株。文献综述

在实际工业化生产过程中，原位产物分离技术已较为成熟与常见，其工艺过程相对简单，十分适合于大规模生产β-苯乙醇。而通过紫外诱变获得能够高产β-苯乙醇的菌株成本相对会比较高[9]，而且在诱变的过程中对于菌株的改变不可控，不能够保证最后诱变出来的菌株就能够提高目标产物的产量，但如今我们还可以利用分子生物学对菌株进行定向的改造，可以通过表达合成β-苯乙醇代谢途径中的关键酶，抑制分支途径所带来的代谢流失，最终达到提高产量的目的[10]。

1。5本课题的研究目的和意义

    本课题的研究目的在于运用生物转化法产β-苯乙醇，其相关研究在我们国家还仍旧处于起步阶段，在国外以及发达国家中，大多都是利用酵母菌进行生物转化，目前大多数的文献、报告中也通常是使用酵母菌来产天然的β-苯乙醇。而我们这次课题旨在能够筛选出产β-苯乙醇的原核微生物，并且通过一系列的生理生化鉴定以及16S rRNA技术对于已筛选出来产β-苯乙醇的原核菌株进行菌体种属的鉴定。在该基础上我们同样需要研究原核菌在发酵产β-苯乙醇的过程中菌体的生长曲线、底物的消耗曲线等一系列数据同酵母菌产β-苯乙醇浓度进行比较，验证所筛选出来的原核菌产目标产物的能力，同时阐明原核和真核微生物二者中哪一种更具有工业大批量生产β-苯乙醇的价值。最后在之前的基础上，我们再对生物转化过程中各个因素进行优化，比如摇床转速、温度、培养基碳氮比、pH等，通过单因素实验可以初步得出原核菌株产β-苯乙醇的最佳条件。

该课题不仅对于我个人而言，乃至对将来β-苯乙醇相关研究进展都可谓意义重大。在我个人方面，这次所选择的课题是对我四年来生物专业知识学习的一个综合运用，在实验过程中会采用到多种曾经学习过的实验操作，学以致用，并且在研究阶段可以学会去发现问题，提出问题，独立解决所发生的问题，从失败中总结实验教训，最终得出所需验证的结果。这不单单是对所学内容的一次考察，同样也是为之后离开学校从事专业相关工作打下坚实的基础。来,自,优.尔:论;文*网www.youerw.com +QQ752018766-