摘 要:本论文采用一种新的工业过程操作优化方法——可视化优化方法,对利用生物表面活性剂硫酸粘杆菌素通透性处理重组大肠杆菌BL21生产海藻糖合成酶的工艺条件进行优化。结果表明:以1。40 g/L的硫酸粘杆菌素为渗透剂,35℃渗透处理72 min,即得透性化细胞海藻糖合酶,酶活是传统超声破碎法制得的2。09倍。所得透性化细胞间歇反应时,以30%麦芽糖为底物进行海藻糖转化实验,转化率可达70%,重复使用16批(12 h/批),转化率可保持在65%以上。77616
毕业论文关 键 字:海藻糖合成酶,硫酸粘杆菌素,通透性处理,可视化优化方法
Abstract:For optimizing the technological conditions of producing trehalose synthase from E。 coli BL21 after permeated by colistin sulfate, a novel visualized method for the operation of industrial process called visualized optimization method was adapted in this paper。 The results indicated that a proper process was achieved with cell suspension treated by 1。40 g/L colistin sulfate for 72 min at 35℃ and the obtained enzyme activity was 2。09 times more than that of traditional methods。 Utilizing the permeabilized cells for batch fermentation, the maximum conversion rate could reach 70% with 30% maltose as the substrate。 The cells could be also used for at least 16 batches (12 h per batch), the conversion rate kept above 65%。
Keywords: Trehalose synthase; Colistin sulfate; Permeable treatment; Visualized optimization method
目 录
1 前言 3
1。1 海藻糖的背景 3
1。1。1 海藻糖的化学结构 3
1。1。2 海藻糖的理化作用 3
1。1。3 海藻糖的应用 3
1。2 海藻糖合成酶 4
1。3 海藻糖合成酶的提取工艺 4
1。3。1 传统提取工艺 4
1。3。2 细胞的透性化处理 4
1。4 硫酸粘杆菌素对细胞的透性化处理 5
1。5 海藻糖的测定方法 5
1。6 本课题的研究内容及意义 6
2 实验材料与方法 6
2。1 实验材料 6
2。2 实验方法 7
2。2。1 重组大肠杆菌发酵生产海藻糖合成酶 7
2。2。2 通透性大肠杆菌的制备 7
2。2。3 酶活测定 7
2。2。4 海藻糖含量的测定 7
3 结果与讨论 8
3。1 通透性处理大肠杆菌实验参数的优化 8
3。1。1 通透性试剂的最适浓度 8
3。1。2 通透性处理的最适时间 8
3。1。3 通透性处理的最适温度 9
3。2 通透性细胞海藻糖合成酶的反应工艺条件优化 10
3。2。1 设计正交实验 10
3。2。2 函数拟合结果 10