摘要：乌苏里拟鲿是分布于黑龙江水系及太湖、洪泽湖水域的名贵淡水经济鱼类，因其较高的经济价值近年来逐渐发展为我国的一种名特优养殖品种。本文以性反转乌苏里拟鲿尾鳍组织为材料 ,采用改进的酚 - 氯仿法提取基因组DNA ,并进行了紫外分光光度纯度和浓度检测、应用性别特异性分子标记进行PCR扩增、琼脂糖凝胶电泳方法鉴定乌苏里拟鲿的遗传性别。78963

毕业论文关键词 ： 乌苏里拟鲿，基因组DNA，遗传性别鉴定

Abstract： Pseudobagrus ussuriensis is a kind of economic fish in freshwater which distribute from Heilongjiang River to the Tai lake。 It has become a important aquatic strain in recent years because of its high economic value．the genomic DNA were extracted from caudal fin clips with the modified the phenol–chloroform method in pseudobagrus ussuriensis。 The genomic DNA were valuated by spectrophotometer for its purity and content, and the DNA were amplified by sex specific marker and the products were separated on agarose gel electrophoresis to identify the genetic sex in pseudobagrus ussuriensis。

Key words：pseudobagrus ussuriensis, genomic DNA, genetic sex identification

目录

1 前言 5

1。1 鱼类遗传性别的特点 5

1。2 鱼类性别的可变性 5

1。3 生物技术育种的途径 6

1。4 本项目的意义 6

2 材料和方法 8

2。1 实验材料 8

2。2 试剂和仪器 8

2。3 基因组DNA的提取 8

2。4 PCR选择扩增雄性特异性片段 9

2。5 琼脂糖凝胶电泳检测 10

3 实验结果 10

3。1 DNA浓度与纯度检测 10

3。2 样品鱼的遗传性别鉴定 12

4 讨论 12

参 考 文 献 13

致 谢 14

1 前言

1。1 鱼类遗传性别的特点

作为低等的脊椎动物, 鱼类在动物系统演化中处于承前启后的地位。已知的鱼类有 28000 种之多,具有极为丰富的物种多样性。鱼类庞杂的生殖策略,几乎涵盖了脊椎动物界的所有生殖类型。鱼类性别分化模式和性别决定机制存在多样性。鱼类的性别表型包括雌雄同体、单性别、雌雄异体以及同时存在单性和有性双重生殖的种类等 ; 性染色体决定型存在XX/XY,ZZ/ZW,XX/XO,ZZ/ZO等,以及复合性染色体类型如XX/XY1Y2 ,ZZ/ZW1W2 ,X1X2 X1X2/X1X2Y, X1X2 X1X2/X1X2 X1等[1]。论文网

1。2 鱼类性别的可变性

性别分化和性别决定相互联系又有所区别,具双向潜力的未分化性腺经过程序性发生的一系列事件,发育成精巢或卵巢,并出现第二性征的过程称为性别分化,而性别决定则是确定性分化方向的方式。性反转是个体从一种性别特征转变为另一种性别特征的现象。性反转只是生殖腺及由此引起的表型性征的改变,而染色体组型是不改变的。性反转是只有在雌雄异体的生物才会出现的现象,而雌雄同体的生物并没有此类现象发生。根据定义可将性反转分为XX性反转(染色体型为XX,表型为雄性)和XY性反转(染色体型为XY,表型为雌性)两种类型[2]。鱼类在整个脊椎动物中,其性别类型和表现形式格外丰富多彩[3]。某些鱼类中存在特殊的天然性反转现象,石斑鱼、真鲷和黄鳝等鱼类的性转化是个体发育的必经事件,性逆转的分子机制一直是鱼类生殖发育研究领域一个经典又有趣的课题，许多鱼类的生长往往与其性别有关。有的种类雌鱼比雄鱼生长快，个体大，如鲤、泥鳅、鳡、丁鱥、半滑舌鳎等；有的种类则是雄鱼比雌鱼生长快，个体大，如罗非鱼、黄颡鱼、瓦氏黄颡鱼、乌鳢、斑鳢等[4]。精巢、卵巢的发育和维持都需要性激素的参与。在鱼类性反转的过程中, 多种性激素含量也相应发生了变化。在哺乳动物中,性别一旦形成 ,一般不易逆转。而在鱼类中,除性染色体外,常染色体上的某些基因和一些外部环境因素亦参与性别决定和分化,这使得鱼类性别具有较大的可塑性,鱼类原发性性别形成后,在激素、温度等作用下可发生逆转,如 Rougeot等采用投喂甲基睾酮(MT)的方式处理40-71 g 的河鲈 ,获得了100%的雄性率。迄今为止,至少在47种鱼类进行了性逆转诱导实验,并取得了良好的效果[5]。文献综述