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耐热植酸酶菌株发酵产酶培养基条件的优化(3)
表1 正交试验水平
水平 葡萄糖(A)(%) 胰蛋白胨(B)(%) 氯化钾(C)(%)
12结果与讨论
2.1 最适碳源及最佳添加量
分别以葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、淀粉、乳糖、麸皮为碳源,测定菌株zk1266产植酸酶的酶活性。碳源添加量均为5%,结果如图1所示。由图1可以看出当以葡萄糖或蔗糖为碳源时酶活力相对较高,均高于75U/mL,而且以葡萄糖为碳源时酶活力达到100U/mL。当以乳糖与淀粉为碳源时酶活力相对较低,均低于40U/mL。因此,故最佳碳源为葡萄糖。
由图2可以看出,当葡萄糖的添加量不同时,酶活力也发生了相应的的变化,整体上酶活力先上升,之后有所下降。当葡萄糖的添加量为1%到4%时,耐热植酸酶酶活力呈上升趋势,而达到4%后酶活力有所下降。其中4%的葡萄糖添加量时最高酶活力为110.3U/mL。
图1 不同碳源对菌体酶活力的影响
图2 不同葡萄糖添加量对酶活力的影响
2.2 最适氮源及最佳添加量
分别以硫酸铵、硝酸铵、蛋白胨、牛肉膏、尿素、酵母粉为氮源,测定菌株zk1266产植酸酶的酶活性。氮源添加量均为2%,结果如图3所示。由图3可以看出当以蛋白胨与牛肉膏为氮源时酶活力相对较高,均高于70U/mL,而且以蛋白胨为氮源时酶活力达到100U/mL。当以硝酸铵与尿素为氮源时时酶活力相对较低,均低于5U/mL。因此,故最佳氮源为蛋白胨。
由图4可以看出,当蛋白胨的添加量不同时,酶活力也发生了相应的的变化,整体上酶活力先上升,之后有所下降。当蛋白胨的添加量为1%到3%时,耐热植酸酶酶活力呈上升趋势,而达到3%后酶活力有所下降。当蛋白胨添加量为3%和4%时,耐热植酸酶酶活力较高,均大于100U/mL,其中3%的蛋白胨添加量时酶活力为125.78U/mL。
图3 不同氮源对菌体酶活力的影响
图4 不同蛋白胨添加量对酶活力的影响
2.3 无机盐的影响
分别以氯化钾、氯化钠、氯化钙、硫酸锰、硫酸亚铁、硫酸镁、硫酸锌为无机盐,测定菌株zk1266产植酸酶的酶活性。无机盐的添加量均为0.05%,结果如图5所示。
由图5可以看出当无机盐为氯化钾,氯化钠与硫酸锌时酶活力相对较高,均高于90U/mL,而且无机盐为氯化钾时酶活力达到100U/mL。当无机盐为硫酸亚铁时酶活力相对较低,均低于85.73U/mL。因此,图3可以看出,最优无机盐为氯化钾。
由图4可以看出,当添加的氯化钾的量不同时,酶活力也发生了相应的的变化,整体上酶活力先上升,之后有所下降。当氯化钾的添加量为0.05%到0.3%时,耐热植酸酶酶活力呈上升趋势,而达到0.3%后酶活力有所下降。当氯化钾添加量为0.3%和0.35%时,耐热植酸酶酶活力较高,均大于125U/mL,其中3%的氯化钾添加量时酶活力为131.5 U/mL。
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