1。5序列的测定及分析

对PCR扩增产物进行统一测序，由上海英潍捷基公司完成。

获得测序结果后，将结果整理置入Arlequin3。5中进行分析。

1。6截形叶螨种群遗传分化分析

本研究中，我们通过分子变异模型分析（Analysis of Molecular Variance，AMOVA）对截形叶螨自然种群的遗传分化模式进行了分析，通过对不同因素的分类方法，来研究Wolbachia以及地理因素对截形叶螨自然种群分化的影响。

2结果与分析

2。1不同地理种群截形叶螨mtDNA的单倍型分析

本研究中，通过对10个截形叶螨自然种群（表3）中的mtDNA-cytb的分析，得到基于不同地理分布的截形叶螨单倍型网络系统发育关系（表4、图2）。本研究中，我们共检测377头个体的mtDNA-cytb基因，发现共有10个单倍型（H1~H10）。

从图中可以明显的看到，不同的单倍型之间存在着较大的差异，碱基差异最大的HAP7和HAP10之间有6个碱基不同。在这10个不同的单倍型中，每个单倍型所包含的个体数也是不同的，表现为HAP1的个体数最多，HAP5次之，而HAP4、HAP6和HAP10最少。文献综述

2。2截形叶螨不同单倍型中Wolbachia的感染情况

在这10种不同的单倍型所包含的个体中，感染Wolbachia是比较普遍的，总感染率为29。7%。但是在不同的单倍型个体中，Wolbachia的感染情况不尽相同，存在一定的差异。总体来看，单倍型内的个体数越多，这些个体中的感染率就越高（图1）。

由于有些单倍型内的个体数较少，就个体数较多的HAP1、HAP2、HAP3和HAP5来看，当个体数较多时，总感染率可能会更高。

具体的感染情况见表4、表5。

2。3截形叶螨mtDNA多样性分析

在得到了这10种单倍型之后，我们便进行了单倍型多样性检测（表6）。结果显示，cytb的核苷酸多样性Pi平均值为0。00217，各个种群的核苷酸多样性在0。000（JCC、FQZ）-0。0016（HCZ）之间。cytb的单倍型多样性Hd品均值为0。678，各个种群的单倍型多样性在0。000（FQZ、JCC）-0。582（SCY）之间。

将所有单倍型分成感染与不感染Wolbachia两组再进行多样性分析是得到了这样的结果：感染来;自]优Y尔E论L文W网www.youerw.com +QQ752018766-的个体核苷酸多样性Pi平均值为0。00171，单倍型多样性Hd品均值为0。547，未感染的个体苷酸多样性Pi平均值为0。00235，单倍型多样性Hd品均值为0。716。两种多样性都是未感染的较高。

在每种地里种群内，Wolbachia的感染基本都降低了这两种多样性，但是在地里种群SCY中多样性不降反升了。这说明Wolbachia的影响是比较复杂的，不仅仅是降低或增加了多样性这么简单。

2。4中国截形叶螨自然种群的遗传分化分析

接下来，通过分子变异模型分析（AMOVA），对影响不同地里种群遗传分化的因素进行了初步探究。