因此,本研究以菊花为研究载体,以总黄酮为研究指标,采用NIR法建立其快速质量评价体系,为菊花的质量控制提供一种可能,为中药材指标性成分快速检测方法的发展提供支撑,从而为NIRS快速检测中药材提供实验依据和科学支持,为进一步利用NIRS技术开展现场速检奠定基础。研究结果对道地药材品质评价具有重要意义。

1 材料

1。1 药品与试剂

木樨草素(批号:111520-200504)购自中国食品药品检定研究院。70%乙醇、5%亚硝酸钠水溶液、10%硝酸铝水溶液、4%氢氧化钠水溶液、菊花药材(购自全国)。试剂均为分析纯。

1。2 仪器

UV-2401紫外-可见分光光度计(日本 岛津),BP211D型电子天平(美国Sartorius),Antaris傅立叶变换近红外光谱仪(美国Thermo Nicolet)配有InGaAs检测器、积分球漫反射采样系统、Result 操作软件、TQ Analyst V6 光谱分析软件等。

2 实验方法

2。1紫外-可见分光光度法测定菊花中总黄酮含量

2。1。1 溶液的制备

(1)菊花样品的制备

    收集菊花并把收集的菊花粉碎过40目筛,40℃烘箱烘24小时,放入自封袋并编号,放入干燥器备用。

(2)对照品溶液的制备

取经五氧化二磷干燥24 h的木犀草对照品适量,精密称定,加甲醇制成每1mL含0。0980 mg的溶液,即得对照品储备液。

(3)样品溶液的制备

取菊花药材粉末(40目)约0。1 g,精密称定,于15mL离心管内,精密加入5mL 70 %乙醇溶液,称重,超声60 min,称重,补足失重,离心,取上清液,即得样品溶液储备液。

精密量取上述样品储备液0。2 mL,置于10 mL容量瓶中,加入质量分数5%的 NaNO2 水溶液 0。5 mL,摇匀,放置6 min;再加入质量分数 10%的 Al(NO3)3水溶液0。5 mL,摇匀,再放置6 min;加入质量分数4%的NaOH水溶液4。0 mL,放置15 min。加入适量甲醇稀释至刻度,摇匀,即为可见分光光度法测定用样品反应液。

2。1。2方法学考察

进行了样品的提取方法、线性范围、精密度、重复性、稳定性及加样回收率的考察。

81个购自不同产地的菊花样品,按“2。1。1(3)”项下样品溶液的制备方法进行制备,在510nm下测定其吸光度并记录。

2。2 NIR法的测定

2。2。1 NIR扫描条件

采用积分球漫反射检测系统;NIR光谱扫描范围4 000~10 000 cm-1;扫描次数16;分辨率 8 cm-1;增益1,以内置背景为参照。每批样品重复测定3次,取均值。

2。2。2校正模型的评价参数来*自-优=尔,论:文+网www.youerw.com

以PLS法分别建立总黄酮和NIR光谱之间的定量校正模型,以模型的R、RMSECV、RMSEC及RMSEP为指标,评价方法的优劣及优化建模的参数。计算公式见(1)、(2)和(3)。

               

             

           

其中 表示包括训练集和预测集所有样本实际值的平均值, 是实际值, 是预测值, 是训练集样本数, 是校正集或预测集样本数。

3结果

3。1紫外-可见分光光度法测定菊花中总黄酮含量的结果

3。1。1 方法学考察

(1)提取方法考察

1)单因素考察

①提取溶剂的选择

取菊花药材粉末(40目)0。1g,18份,精密称定,置于离心管中,分别加入60%甲醇、70%甲醇、80%甲醇、60%乙醇、70%乙醇、80%乙醇5mL,称重,超声60 min,称重,补足失重,离心,取上清液,0。2 mL,同“2。1。1(3)”项下可见分光光度法测定用样品反应液制备,于510nm处测定吸收度

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