传统的油脂分析方法在生活中,大多数食用油的提取都是来源于植物的种子,虽然甘油三酯的种类、结构复杂多变,但是用于制备食用油中的脂肪酸大多数是一些结构简单的C18不饱和脂肪酸。比如在橄榄油的原料中,含有超过百分之七十的油酸;在红花油的原料中,含有超过百分之七十的亚油酸,在其他的食用油中,像是玉米油、花生油、大豆油中也含有丰富的油酸和亚油酸。近年来人们比较关心的在一些工业应用以及商业应用的油中,含量较多的饱和脂肪酸,对人体的健康会产生一定影响。与大多数植物油脂相同的是,动物脂肪组织中所富含的动物油脂也大多数是由简单的C18不饱和脂肪酸组成,这类动物油脂也可以作为食用油使用。对食用油结构的分离分析,对人体的健康来说是具有重大的意义的。72208

高效液相色谱法在甘油三酯分析中的应用

由于高效液相色谱法的高效高速分离分析的特点以及简便的可操作性,已经广泛的应用于甘油三酯的分析。根据仪器中流动相和固定相的不同,可将该法分为高效液相正相色谱法和高效液相反相色谱法。近年来,二维色谱法、混合模式色谱法也越来越受到人们的关注。

 在正相高效液相色谱法中,可以分离不同种类的脂质化合物。在色谱图中,碳原子数越少,甘油三酯类化合物在色谱图中的响应就越强,甘油三酯类化合物的响应与保留与碳原子数目呈反相关系。钟南京等[4]通过实验研究发现,在高效液相色谱分离分析中,与饱和的甘油三酯类化合物相比较,不饱和的甘油三酯类化合物在正相色谱图中的保留更强。银离子高效液相色谱技术是一种特殊的正相色谱技术,通常在流动相中加入乙腈后,乙腈可以与不饱和有机物中的双键和过渡金属产生的一种不可逆的络合作用相互竞争络合,通过乙腈含量的改变,可以使不饱和有机物完成分离,从而进行分析。Andrzej等[5]通过实验研究发现,银离子高效液相色谱技术的基本原理是通过一种较弱的吸附作用,从而将双键数不同的甘油三酯进行分离。论文网

在高效液相色谱技术中,反相高效液相色谱法是分离甘油三酯的最普遍、最广泛的一种常用技术,在反相高效液相色谱中,常采用的是非极性色谱和极性洗脱液,常使用的色谱柱是C18色谱柱。因为甘油三酯不溶于水,所以在分析时采用非水流动相,在分离食用油中甘油三酯的组成时,常用的方法之一就是基于十八烷基键合硅胶固定相的非水反相液相色谱。甘油三酯在非水反相液相色谱法中的保留强度主要取决于当量碳原子的数目,甘油三酯在C18色谱柱上的保留时间随等价碳原子数钼的增大而增强。(等价碳原子数目的多少相当于甘油三酯中酰基链上的碳原子总数减去两倍的双键数)。Momchilova S等[6]通过使用反相液相色谱(RP-HPLC),考察了与二氯甲烷,四氢呋喃,1-丙醇,2-丙醇,乙醇,丙酮混合的乙腈的二元流动相和四种具有不同百分比游离硅烷醇基团的固定相的ODS柱,成功分离了甘油三酯中的区域选择性异构体。

在二维高效液相色谱技术中,普遍使用的是两根或者多根不同的液相色谱柱串联在一起,通过柱结合技术使不同的液相色谱柱连接,从而提高色谱分析的分辨率和峰容量,因此在甘油三酯的分离分析中,二维液相色谱技术应用还是比较广泛的。通过不同的两种离线或在线联用的方式,可以对甘油三酯进行高选择性的分离。Hu J等[7]通过实验研究建立了在非水反相液相色谱技术和银离子色谱技术的基础上,将两种方式结合的离线二维色谱联用技术,并将该技术用于分离甘油三酯。离线二维色谱联用模式虽然具有较高的分辨率和峰容量,但操作时间长、步骤繁琐,不利于高通量分析;在线模式虽然具有一系列的优点,但是复杂性却增加了;由于需要考虑两维溶剂的兼容性,所以这两种不同保留机理的分离模式都不利于实现高效快速分析。

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