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    图4 加入不同浓度金霉素的铜绿微囊藻抑制率柱状图
    表4 加入各个浓度金霉素的铜绿微囊藻抑制率
    铜绿微囊藻抑制率    24h    48h    72h    96h    120h    144h
    1 ppm    -0.107249    0.044775    0.027063    0.005859    0.071927    -0.008535
    2 ppm    -0.090125     0.029910     0.072938     0.142423     0.170827     0.045997
    5 ppm    -0.060481     0.053491     0.103448     0.138815     0.145333     0.009441
    10 ppm    0.063973     0.236245     0.297332     0.335294     0.444459     0.131012
    15 ppm    0.047251     0.322378     0.366688     0.414097     0.525489     0.485524
    由上表可知:在24h时,浓度较低的几组:1 ppm、2 ppm、5 ppm抑制率都呈负值,说明短时间内低浓度的金霉素对铜绿微囊藻的生长起促进作用。在48 h~144 h之内的所有浓度梯度的铜绿微囊藻的抑制率都逐渐增大,到120 h之时抑制率最大,在144 h抑制率开始减少。其中:1 ppm的最大抑制率为7.1927 % ( 120 h时);2 ppm的最大抑制率为17.0827% ( 120 h时);5 ppm的最大抑制率为14.5333% ( 120h时);10 ppm的最大抑制率为44.4459% ( 120 h时);15 ppm的最大抑制率为52.5489% ( 120 h时 )。以上数据我们可以看出,加入金霉素的浓度越大,它对铜绿微囊藻细胞的抑制率也越大。此外,本次实验中,无论金霉素浓度多少,抑制率在120 h总是最大的。

     
    图5 96h时的EC50线性拟合方程
    EC50,半最大效应浓度( concentration for 50% of maximal effect, EC50 )是指能引起50%最大效应的浓度。它是药物安全性指标。其含义是:引起50%个体有效的剂量扩大多少倍,才会导致50%的个体死亡(或中毒)。此值越大,用药相对越安全。本次实验取96h时加入各个浓度金霉素样液的抑制率作趋势线。由图中公式可以算出,96h EC50=35.11。
    4.3 蛋白含量
    4.3.1 考马斯亮蓝标准曲线
    表5 标准曲线浓度对应吸光度表
    标准蛋白质浓度/mol    0    0.05    0.1    0.2    0.3    0.4    0.5
    吸光度A595    1.718    1.834    1.893    1.92    1.936    1.97    1.984
    图6 考马斯亮蓝标准曲线图一
    图7 考马斯亮蓝标准曲线图二
    4.3.2 铜绿微囊藻蛋白含量
     
    图8 铜绿微囊藻蛋白含量柱状图
    我们将测得的吸光度对应图6的标准曲线换算成浓度,作出图8,从蛋白实验的结果来看,微囊藻的蛋白含量呈先增长后逐渐平稳的趋势,第0天到第3天之内,藻细胞浓度显著增大,这是因为藻细胞处于生长期,而第3天到第6天的下降,则是说明了金霉素开始发挥其毒理效应。除空白样外,其他样液蓝藻随着时间逐渐变黄死亡。最后蓝藻各个浓度梯度的蛋白含量几乎相同,整体而言,蛋白含量随着金霉素浓度的增加而降低。
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