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腺梗豨莶提取物对3T3-L1脂肪细胞增殖及胰岛素抵抗作用的研究(3)

时间:2023-07-20 22:56来源:毕业论文
豨莶草始载于唐代《新修本草》,民间别名诸多如:肥猪草、粘苍子、粘糊菜等,是传统的常用中草药。中国药典 2015 年版收载中药豨莶草为菊科植物豨莶

豨莶草始载于唐代《新修本草》,民间别名诸多如:肥猪草、粘苍子、粘糊菜等,是传统的常用中草药。中国药典 2015 年版收载中药豨莶草为菊科植物豨莶 Siegesbeckia orientalisL。、腺梗豨莶 Siegesbeckia pubescens Makino 或毛梗豨莶 Siegesbeckia glabrescens Makino 的干燥地上部分[9]。传统豨莶草被认为具有祛风湿,利筋骨,降血压等药理作用,现今临床常用于类风湿型关节炎和抗血栓作用的治疗,它在韩国也被用于治疗哮喘等过敏性疾病。经研究发现豨莶草的抗炎镇痛作用可减轻佐剂性关节炎(adjuvantarthritis,AA) 大鼠踝关节炎症;抗过敏作用可抑制免疫反应导致的组胺释放;心血管保护作用对多柔比星所致的急性心肌损伤产生保护;抑制肿瘤细胞可诱导乳腺癌细胞凋亡的作用;促进创伤愈合作用对实验性大鼠皮肤损伤具有显著修复功能;抗菌作用能特异性抗革兰氏阳性菌等药理作用[10]。由豨莶草中分离得到的奇任醇能够下调脂肪形成转录因子 PPARγ 、 C/EBPα和SREBP-1c,脂质生物合成相关酶 FAS、ACC以及脂肪细胞因子( 脂连素和瘦素) ,从而抑制细胞内脂质堆积[11]。

最新研究发现,通过溃疡性结肠炎动物模型和 PPARγ 转染实验发现腺梗豨莶水提物中具有显著激动 PPARγ 的活性部位,豨莶草水提物中分离得到 PTP1B 抑制剂槲皮素,这些新的发现都有可能是豨莶抗糖尿病的化学物质基础[12-13]。豨莶草具有很高的药用价值,在传统应用上单味制剂豨莶丸是用水为溶剂进行提取的,因此我们对豨莶草水溶性成分进行研究,可能可以更好地阐明其生物活性物质基础。3T3-L1前脂肪细胞分离自小鼠胚胎(17~19 d)的Swiss 3T3细胞,能特异性地被诱导分化成典型的成熟的脂肪细胞的形态,故本实验使用3T3-L1细胞造模进行脂肪增值的抑制和抵抗胰岛素作用的实验研究[14]。豨莶草作为传统抗糖尿病中药,如今最新研究在其中发现的PPARγ激动活性与PTP1B 抑制剂槲皮素等活性组分,都说明豨莶草可能是新型糖尿病治疗药物的最新研究方向,故研究豨莶草水提取物中的活性组分对2 型糖尿病的治疗有实际意义。来自优Y尔L论W文Q网wWw.YouERw.com 加QQ7520~18766

1。实验材料

1。1  实验仪器

1)电子天平:Sartorius BP211D型电子天平,德国Sartorius公司

2)纯水系统:Millipore Simplicity 超纯水系统,美国Millipore公司

3)超声波清洗器:USC-502超声波清洗器,上海波龙电子设备有限公司

4)水浴锅:DK-8D电热恒温水槽,上海精宏实验设备有限公司

5)酶标仪:Synergy 2 Slfpa 全波长多功能酶标仪,美国Bio-Tek公司

6)显微镜:XDS-1B 型生物倒置显微镜,重庆光学仪器厂

7)旋转蒸发仪:R-1005,郑州长城科工贸有限公司

8)细胞培养箱: MCO-15AC型,日本三洋公司

9)超净工作台:SW-CJ-1F型,苏州安泰空气技术有限公司

10)离心机:LD5-2A型,北京医用离心机

11)细胞培养板:美国康宁公司

12)冷冻干燥机:LABCONCO FreeZone型,美国LABCONCO公司

1。2  实验材料与试剂

1)豨莶草                           杭州华东医药公司

2)3T3-L1前脂肪细胞                中科院上海细胞库

3)胎牛血清(FBS)                    浙江天杭生物科技股份有限公司

4)油红O                            Solarbio

5)新生牛血清(NBS)                浙江天杭生物科技股份有限公司 腺梗豨莶提取物对3T3-L1脂肪细胞增殖及胰岛素抵抗作用的研究(3):http://www.youerw.com/yixue/lunwen_187108.html

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