2 材料与方法
2.1 实验材料
2.1.1 实验材料与试剂
a.干香菇:市售
b.纤文素酶:上海国药集团化学试剂有限公司
c.复合风蛋白酶:上海国药集团化学试剂有限公司
d.菲林试剂:
碱性酒石酸铜甲液------15g硫酸铜(分析纯)、0.05g次甲基蓝(分析纯)用蒸馏水溶解并稀释至1000mL。
碱性酒石酸铜乙液------50g酒石酸钾钠、75g氢氧化钠(分析纯)于烧杯中加蒸馏水溶解,再加入4g亚铁 氰化钾(分析纯),完全溶解后,用蒸馏水稀释至1000mL。
e.甲醛:上海国药集团化学试剂有限公司
f.木糖:上海国药集团化学试剂有限公司
g.氨基酸:上海国药集团化学试剂有限公司
h.2-辛醇(色谱纯,99.0%):Dr. EhxenstorferGmbH公司
i.氯化钠(分析纯):上海国药集团化学试剂有限公司
j.蒸馏水用屈臣氏蒸馏水:市售
2.1.2 主要仪器设备
a.料理机:九阳(JOYOUNG)JYL-D055 250W 料理机
b.电子天平:PL403德国梅特勒-脱利多仪器有限公司
c.pH计:PB.10北京赛多利斯仪器系统有限公司
d.电热恒温培养箱:DNP.91 62型上海一恒科学仪器有限公司
e.固相微萃取萃取头:851ma PA美国Supelco公司
f.气相色谱/质谱联用仪:GC7890A/5975C美国Agilent公司
g.电子鼻:气指纹分析仪,FOX 4000
2.2 实验研究方法
2.2.1 香菇酶解反应
(1) 纤文素酶酶解
每个称取5g香菇粉,同时加50g蒸馏水,改变纤文素酶的条件(pH、温度、加酶量),反应1.5h后,通过菲林试剂法测定还原糖的含量,确定纤文素酶的最佳反应条件。
(2) 风蛋白酶
每个称取5g香菇粉,同时加50g蒸馏水,改变风蛋白酶的条件(pH、温度、加酶量),反应2.0h后,通过甲醛电位滴定法测定游离氮的含量,确定风蛋白酶的最佳反应条件。
(3) 纤文素酶和风蛋白酶混合使用
改变两种酶的加入顺序,测定还原糖和游离氮的含量,确定两种酶的最适酶解效果。
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