2 稻草酶水解液脱色工艺的研究

脱色处理是通过吸附剂孔壁上的大量的分子可以产生强大的引力,从而达到将有害物质吸引到孔径中的目的。同时,吸附剂吸附并不具有选择性,从而会使酶水解液中的含糖量降低。本实验用吸附剂为活性炭,活性炭吸附是应用最广,成本较低,效果较好的脱色方法。本试验采用活性炭脱色处理稻草酶水解液,重点讨论不同实验条件下对脱色率与含糖率效果的比较。通过测得的吸光度值来验证实验效果。

2.1 实验材料与方法

2.1.1 实验材料及实验设备

表2-1 本实验主要仪器设备及材料

名称及型号 厂家

UV1900系列紫外可见分光光度计 上海凤凰光学科仪有限公司

DK-600A电热恒温水箱 上海一恒科学仪器有限公司

T-214分析天平 DENVER INSTRUMENT

F20-H恒温反应器 上海申生科技有限公司

SKG电炉(红外电陶炉) 艾诗凯奇(中国)有限公司

盐酸(分析纯) 南京化学试剂有限公司

NaOH(分析纯) 南京化学试剂有限公司

葡萄糖(分析纯) 国药集团化学试剂有限公司

活性炭(颗粒) 天津市大茂化学试剂厂

活性炭(粉状) 江苏竹溪活性炭有限公司

2.1.2 实验方法

(1) 葡萄糖标准曲线绘制

1) DNS法测还原糖原理及DNS试剂的制备

DNS法测还原糖原理:DNS即二硝基水杨酸法是利用碱性条件下,二硝基水杨酸(DNS)与还原糖发生氧化还原反应,生成3-氨基-5-硝基水杨酸,该产物在煮沸条件下显棕红色,且在一定浓度范围内颜色深浅与还原糖含量成比例关系的原理,用比色法测定还原糖含量的。因其显色的深浅只与糖类游离出还原基团的数量有关,而对还原糖的种类没有选择性,故DNS方法适合用在多糖(如纤维素、半纤维素和淀粉等)水解产生的多种还原糖体系中。

DNS试剂的制备:将6.3克DNS(3,5-二硝基水杨酸)和262ml 2mol/L氢氧化钠,加到500mL含有182克酒石酸钾钠的热水溶液中,再加上5克苯酚和5克亚硫酸钠,搅拌溶解,冷却后加水定容到1000mL,即制成3,5-二硝基水杨酸试剂,贮于棕色瓶中备用。

2) 还原糖测定

葡萄糖标准曲线制作:取 5 支 15mm×180mm 试管,按表2-2加入 2.0mg/mL葡萄糖标准液和蒸馏水。在上述试管中分别加入 DNS 试剂 2.0mL,于沸水浴中加热2 min进行显色,取出后用流动水迅速冷却,各加入蒸馏水 9.0mL,摇匀,在540nm 波长处测定光吸收值。以1.0mL蒸馏水代替葡萄糖标准液按同样显色操作为空白调零点。以葡萄糖含量(mg)为横坐标,光吸收值为纵坐标,绘制标准曲线。

样品中还原糖的测定:取2支试管进行编号,分别加入1 mL 还原糖待测液,1mL 的蒸馏水。然后每支试管都加入 2mL的 3,5―二硝基水杨酸试剂,最后置于沸水浴中加热 2min 进行显色,取出后用流动水迅速冷却,各加入蒸馏水 9.0ml,摇匀,在 540nm 波长处测定光吸收值。测定后,取样品的光吸收平均值在标准曲线上查出相应的糖量。

按下式计算还原糖百分含量:

式中:C──还原糖或总糖提取液的浓度,mg/mL;V──还原糖或总糖提取液的总体积,mL;m──样品重量,g

上一篇:稀土对钾盐镀锌的影响
下一篇:油包水的反相微乳液法丹磺酰氯的合成工艺设计

来源于Arabidopsisthaliana羟基...

双酶-无机物酶晶体催化...

桑园土壤N2O气体源汇功能及土壤酶活性特征

发夹型G-四链体探针用于...

蔗糖水解反应速率常数测定的实验改进

凹土微滤膜处理纤维素酶...

纤维素催化水解制备糖类...

互联网教育”变革路径研究进展【7972字】

LiMn1-xFexPO4正极材料合成及充放电性能研究

新課改下小學语文洧效阅...

ASP.net+sqlserver企业设备管理系统设计与开发

张洁小说《无字》中的女性意识

网络语言“XX体”研究

麦秸秆还田和沼液灌溉对...

我国风险投资的发展现状问题及对策分析

老年2型糖尿病患者运动疗...

安康汉江网讯