2.2.2 色谱柱堵塞导致的压力问题
色谱柱长期使用后,也会发生堵塞,造成泵压过高。其主要原因是进样器或流动相带进的一些微小物质,或是某些组分没有及时地洗脱下来,以至于残留在色谱柱上。判断是否为色谱柱堵塞的方法:取下色谱柱,单接两通,如果压力不下降,则说明流路堵塞,流动相未过滤或者样品中有微粒;如果压力下降并且稳定下来,说明色谱柱堵塞了。色谱柱堵塞可以采取梯度洗脱的方法,将柱子再冲洗一段时间,应逐渐地改变流动相的极性,以便把残存于柱内的组分尽可能完全地洗脱干净。
2.3 高效液相色谱仪的基线调整
2.3.1 绘图走基线
每次实验前都需要进行基线调整,液相色谱在0~5mAu下基线水平时才可进行样品检测,整个过程大概耗时30~40min。如果基线偏离0线较大(仅限后面基线走平情况下),可以点击PDA检测器归零图标,如果波动较大,未走平,说明柱子未洗干净有残余物存在,需重新走基线或者清洗柱子。