由于 DNA 可以与多种物质发生特异性相互作用,基于 DNA 的高灵敏度和简易操作的荧 光分析方法不断涌现。Landry[17]等利用可卡因的适配体成功构建了一种荧光分析探针,在适 配体的两端修饰了荧光素和猝灭基团。在缺少可卡因时,探针 DNA 单链处于自由状态,荧 光素的荧光正常;当存在可卡因时,探针 DNA 与可卡因发生相互作用,导致探针 DNA 两末 端靠近,是荧光基团猝灭。

Li[18]等以金纳米颗粒作为靶向识别与信号转导支架,构建了用于蛋白质识别检测的 DNA 传感器。目标蛋白上拥有两个具有亲和性的识别配体,一个通过 DNA1 交联于金纳米颗粒, 另一个交联于 DNA2,将 DNA3 荧光标记,由于其与 DNA1 碱基互补配对,因而 DNA3 上的 荧光基团能被金纳米颗粒猝灭。

钱[20]将荧光标记的氨基苯硼酸修饰到聚唾液酸包裹的金纳米粒子上,制备出一种新型的荧 光关-开可控的金纳米探针,可用于对细胞表面的唾液酸进行原位成像检测。该探针可用于检 测细胞数量和对细胞表面唾液酸的分布情况进行成像,也可用于动态监测细胞表面唾液酸在 药物作用下表达水平的变化。

Stoeva[25]等研究出一种能够在极低摩尔浓度下的缓冲溶液以及血清样本中高效复合检测三 蛋白肿瘤标志物的通用纳米探针。这提供了生物条形码在扩增复用于研究单个样品中的多个 蛋白标记的新机遇。

You[26]等研制出一个含有六个非共价金纳米粒子-荧光聚合物结合物的生物传感器阵列, 用来识别和量化蛋白质目标。金纳米颗粒的存在使聚合物的荧光猝灭;而蛋白质的存在破坏 了纳米粒子-聚合物的相互作用和结构,从而产生不同的荧光反应模式。样品具有高度重复性, 且在纳摩尔浓度下每种蛋白质都具有其各自特性。实验可通过线性判别分析(LDA)定量区 分。基于培育的生物传感器阵列在 280 nm 产生一致的紫外吸收光谱,因而已被成功用于 52个未知蛋白样品的识别,其准确率达到 94。2%。其工作表明了以新型纳米材料为基础的蛋白 质阵列检测器在医学诊断中存在的巨大潜力。文献综述

De[27]等报道了一个基于混合生物分子的使用绿色荧光蛋白技术以及纳米粒子阵列的生物 传感器在具有生物体相关的缓冲溶液和人体血清中检测蛋白的新型方案。无论在缓冲溶液中, 或是加入人体血清时,从五种血清蛋白(人血清蛋白、免疫球蛋白 G、转铁蛋白、纤维蛋白 原和 α-抗胰蛋白酶)中均可区分可重复地获得荧光应答。使用线性判别分析证明了蛋白质的 识别准确率在缓冲溶液中达到 100%,在人体血清中达到 97%。这些实验也证明这种阵列可 以区分不同浓度的同种蛋白质,或是在人体血清中不同蛋白质的混合物。

Peng[28]等设计出基于金纳米粒子的生物传感器,证明其可以在高湿度健康人呼吸的空气 中迅速区分出肺癌患者的呼吸,结合固相微萃取,气相色谱/质谱法来确定 42 个代表肺癌的 挥发性生物标志有机化合物。这些传感器被证明在患者和模拟样本之间具有良好的契合度。 基于金纳米粒子的传感器可以形成一个廉价的非侵入性的诊断肺癌的工具。

Qian[29]设计了一种端粒酶反应介孔二氧化硅纳米粒子(MSN)原位了细胞内端粒酶活性 成像的实现。在包装的 DNA 中封上 MSN 探头,黑洞荧光猝灭基团共价固定在介孔内壁,将 荧光包在孔内,在端粒酶和 dNTPs 的存在下,设计出的 DNA 可以拓展并远离 MSN 的表面形 成一个刚性的发夹样结构的 DNA。此 DNA 可以作为一个“生物门”锁定并释放荧光素,达 到荧光成像的开关效果。实验通过检测细胞端粒酶活性变化对端粒酶相关药物的作用,验证 了该方案的实用性。

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