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植物乳杆菌中亚硝酸还原酶基因的克隆(4)
更有人对检测亚硝酸还原酶类型的各种方法进行了研究,这些酶是由不同微生物产生的。如果要鉴定nirK型和nirS型亚硝酸盐还原酶,可用基因探针的方法;要检测nirK型的亚硝酸盐还原酶,可使用二乙基二硫代氨基甲酸酯来检测[13],也可使用抗血清来进行特异性检测。其中最有效的方法是利用特异性聚合酶链式反应来进行扩增。
实验发现,无论是有氧或是无氧条件下,植物乳杆菌均可降解亚硝酸盐,产生亚硝酸还原酶,最后所得产物是氨。[14]
1.3研究目的及意义
亚硝酸盐广泛存在于我们的生活环境中,尤其它是国家允许使用的食品添加剂,主要分布于动物性产品中,如用于肉制品中,可以增强产品的风,还可使之呈现诱人的鲜红色,并起到防腐抑菌的作用。正是这些原因造成不良商家为了自己的利益在肉类制品生产时不加节制的使用亚硝酸盐,对我们的身体健康造成极大的危害。亚硝酸盐是潜在的致癌物质,在进入人体后,会导致亚硝胺的形成,该物质具有致癌作用的,也可以使血红蛋白失去携氧能力。因此,严格控制亚硝酸盐的使用量,以及如何降解亚硝酸盐是必须引起我们高度重视的。
亚硝酸盐可通过
物理
方法、
化学
方法以及生物方法来实现降解,在这之中,通过微生物作用或利用其产物来达到降解亚硝酸盐的方法,即生物降解法,是目前最值得研究的方法,较之前两种方法也更为安全有效。
本实验通过将植物乳杆菌中的亚硝酸还原酶的基因片段与载体质粒拼接并转化到大肠杆菌中去,得到一种携带亚硝酸还原酶基因的大肠杆菌菌株,可作为之后亚硝酸还原酶基因的表达等问题的研究基础。
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