HPLC多相酶促合成咖啡酸苯乙酯的工艺设计及微反应器强化(4)
（2）抗炎性
研究表明[12]，含有咖啡酸苯乙酯的蜂胶乙醇提取液可以很好地抑制角叉菜胶诱导的关节炎、胸膜炎和大鼠足肿胀，而不含有咖啡酸苯乙酯的提取液则不具有这一效果。说明咖啡酸苯乙酯是蜂胶中发挥抗炎作用的主要组分。另外，咖啡酸苯乙酯可以抑制一氧化氮（NO）的产生， 一氧化氮是一氧化氮合成酶（iNOS）催化L-精氨酸产生的一种自由基，过多的一氧化氮会引起机体的损伤，而且在自身性免疫疾病如溃疡性结肠炎、风湿性关节炎和系统性红斑狼疮等人体中NO合成会增加。咖啡酸苯乙酯可以减少NO生成，减少炎症发生。
（3）抗肿瘤
1988年，Grunberger[13]等从蜂胶中分离提取得到咖啡酸苯乙酯，并对鼠和人的正常细胞、黑素瘤细胞和乳腺癌细胞进行了细胞毒性方面实验，结果表明：咖啡酸苯乙酯对黑素瘤细胞和乳腺癌细胞具有很好的选择性抑制作用，且对人和鼠正常细胞几乎没有毒性。郭川[14]等建立人神经胶质瘤细胞株模型，使用流式细胞术检测咖啡酸苯乙酯对胶质瘤细胞株U251的作用，通过对细胞株模型的观察，发现咖啡酸苯乙酯可以促进神经胶质瘤细胞株的凋亡，结果证明咖啡酸苯乙酯对神经胶质瘤的生长有抑制作用。建立裸鼠胶质瘤模型，观测咖啡酸苯乙酯在实验活体中对胶质瘤抑制效果，运用实时荧光定量PCR和Western blotting技术，实时监测咖啡酸苯乙酯对胶质瘤细胞株异常的Wnt/f1-catenin通路及靶基因c-myc的影响，结果表明咖啡酸苯乙酯可以有效地抑制神经胶质瘤异常WnUlB-catenin通路、13-catenin基因及c-myc基因表达，证明了咖啡酸苯乙酯对肿瘤的生长有很好地抑制作用。
1。2。3咖啡酸苯乙酯的合成进展
咖啡酸苯乙酯虽然有强大的抗氧化和抗肿瘤作用，但是从蜂胶中直接提取咖啡酸苯乙酯用于工厂化生产并不经济，直接提取困难且成本高，阻碍了其作为一般食品的抗氧化剂的使用。因此许多研究主要集中在用化学方法合成咖啡酸苯乙酯。
例如Chen[15]等在室温下，将二环己基碳二亚胺作为反应介质，用摩尔比为1：5咖啡酸和苯乙醇合成咖啡酸苯乙酯，获得了38%的咖啡酸苯乙酯的产率，合成路径见图1。2。Lee[16]等人合成咖啡酸苯乙酯，首先用咖啡酸（5。6 mmol）和SOCl2共热，然后加入苯乙醇（8。4 mmol）再于真空中加热所得到粗产物。最后将粗产物进行柱色谱纯化，这样实现咖啡酸苯乙酯86%的产率。化学合成咖啡酸苯乙酯有许多缺点，尽管两个底物都是天然材料，但是用于合成的试剂对人体有害，还可能会造成环境污染。
最近，咖啡酸和苯乙醇通过酶促合成的咖啡酸苯乙酯技术已经成熟。与化学合成相反，咖啡酸苯乙酯的酶法合成，具有催化特异性、条件温和等优点。Lee[16]等人使用的Novozym 435合成阿魏酸乙酯（Ethyl ferulic，EF），在75 ℃下合成阿魏酸乙酯在2 d内达到87%的产率，而在80 ℃时甲氧基肉桂酸辛酯1 d内达到90%的产率。结果表明，在高温下肉桂酸衍生物的转化率更高。Twu[17]等人研究了在无溶剂体系中使用Novozym 435催化羟丙酸和辛醇直接酯化，反应58。2 h获得95。9%的摩尔转化率。文献综述
图1。2脂肪酶催化咖啡酸和2-苯基乙醇合成咖啡酸苯乙酯
Figure 1。2 Lipase catalyzed caffeic acid and 2- phenyl ethanol synthesis of caffeic acid phenethyl ester
1。3酶催化酯类合成
酯合成工艺的影响因素有：pH、温度、底物比、酶的种类、反应时间、酶量、反应介质等[18]，现在分别对其进行讨论。
1。3。1酶种类和酶量
不同的酶催化不同反应的反应速率不一样，有的酶在这个反应中催化速率高，但是到另外一个反应中催化效果几乎为零。所以对于不同的实验，我们要分别筛选适合高效的酶。所以选择正确的酶对合成工艺有着重要的作用。