由于超氧物阴离子自由基(O2-)寿命短、不稳定,不易直接测定SOD活力,因此常采用间接的化学方法。目前常采用方法有3种:氮蓝四唑(NBT)光还原法、邻苯三酚自氧化法、邻苯三酚自氧化法–化学发光法。本实验采用NBT光还原法,其原理依据SOD抑制NBT在光下的还原作用来确定酶活性的大小,在氧化物质的存在下,核黄素可被光还原,被还原的核黄素在有氧条件下极易再氧化而产生O2-,O2-可将NBT还原成蓝色甲腙,后者在560nm处有很大吸收,而SOD可清除O2-从而抑制甲腙的形成。因此光还原反应后,反应液的颜色越是显蓝,说明酶活力愈低;反之,说明酶活力愈高 [14]。
1.4  盐胁迫对植物的影响
盐胁迫是指在较高盐度的环境中,植物的生长会受到影响。盐分是影响植物生长和产量的一个重要环境因子,在盐胁迫下,多数植物的萌发、生长都会受到抑制作用,高盐会造成植物减产或死亡。究其原因主要体现在两个方面。第一,土壤中若含有过多盐分,会降低土壤溶液的渗透势,导致植物吸水困难,这样往往会使植物形成生理干旱,给植物的生长带来影响;第二,盐离子会破坏质膜透性,Na+能够置换细胞膜结合的Ca2+,膜结合的Na+/Ca2+增加,导致膜结构破坏,功能发生改变,细胞内的K+、磷、有机溶质等向外渗出。
盐胁迫下, 所有植物的生长都会受到抑制,不同植物对于致死盐浓度的耐受水平和生长降低率不同。胁迫引起的植物伤害大部分与活性氧伤害有关,而防御这种伤害的最好方法之一是提高植物体内SOD、POD等抗氧化酶的活性。郑世英等[15]发现盐浓度达到一定程度时,SOD、POD的活性都达到最高,随后随着盐浓度的增加,SOD、POD活性逐渐降低,表明SOD、POD活性不能文持较高水平,反之会导致膜脂过氧化作用加强,细胞膜受到损害。李亚平等[16]研究发现盐浓度对马铃薯脱毒苗叶片中的SOD和POD活性影响极显著,盐比例及盐浓度与盐比例的交互作用对马铃薯脱毒苗叶片SOD和POD活性影响均不显著,随着混合盐浓度的增加Na+含量显著增加,K+含量平缓下降,Na+与K+的比值显著上升。符秀梅等[17]发现,水稻在NaCl浓度为30 mmol/L内POD和SOD的活性与胁迫强度呈正相关。
1.5  互花米草的研究前提
1.5.1  分布现状
国外:美国东南部海岸;在美国西部和欧洲海岸归化.
国内:广泛分布于广东、福建、浙江、上海、江苏、山东、天津以及辽宁等省市的沿海地区,特别是江苏沿海,互花米草的面积已经达到125km2,形成了全国面积最大的互花米草人工盐沼[18];
上海地区主要分布在崇明岛东部和北部、南汇边滩、横沙岛东部、杭州湾北岸和九段沙,此外,长兴岛北岸和西部、扁担沙和北支中段的黄瓜沙附近均有发育[5]。
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