生物转化2-苯乙醇辅因子NADH/NAD+的检测研究(12)
利用Design-Expert软件绘出响应面立体分析图，如图4-1～图4-3所示。先将第3个变量保持在编码的0水平，每个响应面分别代表2个独立变量之间的相互作用。
图4-1 超声时间和震荡次数的交互作用对辅酶提取率的影响
Fig.4-1 Interaction effect of ultrasonic time and number of shocks on yield of
coenzyme from yeast
从图4-1可以看出，超声时间的曲面比较陡，而温度的曲面较平缓，从上图可以得出结论超声时间对辅酶提取的影响显著。震荡次数的影响较超声时间不显著；同时从中等高线的密集程度可以看出超声时间沿轴向较震荡次数密集，可以说超声时间对辅酶提取比震荡次数的影响；如图所示等高线为圆形，说明两因素的交互作用较弱，对辅酶的提取率的影响不显著。
图4-2 超声时间和入提取液的量的交互作用对辅酶提取率的影响
Fig.4-2 Interaction effect of ultrasonic time and the amount of added extract on yield of coenzyme from yeast
从图4-2可以看出，超声时间的曲面走势比较陡，而加入提取液的量的曲面走势较为平缓，从上图可以得出结论超声时间对辅酶提取的影响显著。加入提取液的量的影响较超声时间不显著；同时从中等高线的密集程度可以看出超声时间沿轴向与加入提取液的量都较为密集，可以得出结论为：超声时间对辅酶提取比加入提取液的量的影响；
图4-3 加入提取液量和震荡次数的交互作用对辅酶提取率的影响
Fig.4-1 Interaction effect of the amount of added extract and number of shocks on yield of coenzyme from yeast
从图4-3可以看出，震荡次数的曲面走势比较陡，而加入提取液的量的曲面走势较为平缓，从上图可以得出结论震荡次数对辅酶提取的影响显著。加入提取液的量的影响较震荡次数不显著；同时从中等高线的密集程度可以看出震荡次数沿轴向较加入提取液的量的密集，可以得出结论为：加入提取液的量对辅酶提取比震荡次数的影响显著；
由响应面图4-1～图4-3可以看出：超声时间（B）和震荡次数（A）对酵母内辅酶NADH/NAD+的提取影响显著，表现为曲面较陡。随着超声时间（B）和震荡次数（A）的增加辅酶提取的含量逐渐增加，
５.实验结果分析
Plackett-Burman 试验设计可以从较多对实验有影响的因素中通过较少的试验筛选出对实验影响较为显著的因素，通过PB设计巧妙的避免了在后期的一些优化试验中由于某些不显著的因素而浪费实验资源和时间。而响应面分析法在优化多变量的系统中是一个有效的工具。响应面克服了传统的只能给出最佳因素水平组合而无法找出整个区域上因素的最佳组合和响应值的最优值的缺陷的正交实验。它不仅是研究因素与响应值之间同时还能研究因素与因素之间相互关系的，本次实验通过Plackett-Burman设计与响应面分析法相结合，从而快速、有效地从影响酵母中提取辅酶NADH/NAD+的提取过程的因素中筛选出关键因素，为下一步的工艺优化打下基础。
经过响应面的实验分析确定酵母中提取辅酶NADH/NAD+的最佳条为：
超声功率为：300W；超声时间为：12.15min；提取液的加入量为：2.36m；震荡次数为：6.03次。在此条件下从酵母中提取的辅酶含量最高为2.21umol/L。