2。2。3 花序浸染法转化拟南芥 8

2。2。4 拟南芥转化后代鉴定和观察 8

2。2。5 CTAB微量法提取基因组 DNA 8

2。2。6 转基因植株的 PCR 筛选 9

3 结果与分析 9

3。1 拟南芥T1代转化植株 9

3。2 转基因植株的鉴定 11

4 讨论与展望 11

4。1 实验步骤讨论 11

4。1。1 Baste筛选时未出现明显表型差异 11

4。1。2 未提出DNA或DNA得率较低的原因 11

4。1。3 PCR电泳无条带原因 11

4。1。4 凝胶凝胶电泳拖带的原因 12

4。2 展望 12

参考文献 13

致谢 13

1前言

1。1 模式植物拟南芥来自优Y尔L论W文Q网wWw.YouERw.com 加QQ7520~18766

拟南芥（Arabidopsis thaliana）属十字花科鼠耳芥属，是一年生细弱双子叶草本植物。在野外条件下一般春季萌发，夏季种子成熟[1]。株高15-30cm，随着生长条件或培养条件的变化而变化，基生叶多数，长圆形或椭圆形，呈现莲座状排列。总状花序顶生。成熟时可产生75-90个果荚，每个果荚含有40-70粒种子，种子小而多。它天然自花授粉，世代时间短，生存所需空间小，基因组小且高度纯合，便于进行功能基因组分析，用理化因素处理突变率很高，容易获得各种代谢功能的缺陷型，是植物遗传和发育研究中的重要模式作物之一，被称为植物中的“果蝇”[2,3]。

1。2 低温胁迫对植物的影响

温度作为一种存在感强烈的环境因素，能够对植物的生长发育产生重大影响[4，5]。植物在一定温度范围内才能正常生长。因此，对植物生长最适宜的环境温度被称为最适温度，环境温度低于或高于最适温度都会对植物的生长造成影响。对于种植作物的广大地区而言，低温胁迫是经济作物受到的主要环境胁迫之一。根据温度对大多数温带植物的胁迫程度，低温可被分为冷害和冻害。

当环境温度低于10℃但高于零度时，植物受到的伤害被称为寒害[6]。寒害是喜热植物北移的主要障碍。从细胞层面上看，寒害易造成植物：1。细胞质膜结构和功能的改变。低温寒害下,植物的细胞膜结构遭到破坏，选择透过性丧失，使得一些盐类和有机物渗出，破坏细胞的离子平衡。2。 原生质体的流动性发生改变。3。影响植物对水和养分吸收。4。 影响呼吸及光合作用。5。 影响细胞内物质代谢。冻害是指环境温度低于零度时对植物细胞造成的伤害。植物细胞的含水很高，可达70%，这些水分由大量的自由水和结合水组成。自由水在细胞内地状态会因为温度的改变而改变。温度过低会导致细胞中的物质结冰，破坏细胞膜，造成胞内物质向外渗透。冻害常给植物带来致命伤害。论文网