脱蜡:切片脱蜡是采用不同比例的二甲苯以及不同浓度发乙醇(二甲苯6h→二甲苯:无水乙醇=1:1→无水乙醇→95%)。
染色与封片:用1%番红染色24h→85%→0。5%固绿对染→95%→100%→二甲苯:无水乙醇=1:1→纯二甲苯,中性树胶封片。
观测:放置装片待树胶干燥后即可用逆射光学显微镜进行检测,根据要检测的内容选取能代表叶片解剖特征的结构进行观察、拍照。
1。2。2中脉的处理方法
对华顶杜鹃和云锦杜鹃叶片主叶脉的研究同样采用石蜡切片法,取样部位为健康叶片的中部,操作方法和叶片石蜡切片制作方法相同,但是主叶脉相比叶片来说多了一些厚角等支持组织,所以在操作过程中对主叶脉的脱水、透明和浸蜡等步骤的处理时间可以比叶片增加一到二小时左右。
1。2。3观察和数据处理
通过石蜡切片法制成的永久装片,观测指标有两个种各样地的角质层厚度和上下表皮细胞厚度以及叶片厚度,基本薄壁组织栅栏组织厚度与海绵组织厚度及两者比值,主叶脉中维管束个数等方面。所测量数量均为每个视野下随机选5个细胞,随机选6个视野,共测30组数据。最终所得数据均为统计30个后的平均值。选取具有代表性的部分进行拍照。
2 结果与分析
2。1叶片结构解剖特征
2。1。1华顶杜鹃叶片结构解剖特征文献综述
华顶杜鹃叶片的解剖结构是由上下表皮、叶肉组织和维管系统组成,上表皮细胞外壁平滑,厚度平均值大概在44。28μm之间,具有角质层但是较薄,平均值大概在9。40μm之间,下表皮细胞横切面形状不规则,与上表皮一样外壁平滑,厚度平均值大概在31。85μm之间,具有角质层但是较薄,平均值大概在8。14μm之间;华顶杜鹃和云锦杜鹃都是是背腹异面叶,基本薄壁组织都具有栅栏组织和海绵组织,其中栅栏组织1-2层,厚度平均值大概在102。35μm之间,栅栏组织和海绵组织的细胞排列大盘山的盘山尖和牛角尖以及金华北山较为紧密,而四明山、高二乡和天台则较为疏松,海绵组织的厚度平均值大概在183。69μm之间;栅栏组织与海绵组织厚度之比平均值大概在0。58μm之间;叶片厚度大概在374。86μm之间。叶绿体大量存在于栅栏组织中,而含晶细胞则存在于海绵组织。见表2-1
2。1。2云锦杜鹃叶片的解剖特征
云锦杜鹃叶片的解剖结构是由上下表皮、叶肉组织和维管系统组成,上表皮细胞外壁平滑,厚度平均值大概在36。16μm之间,具有角质层但是较薄,平均值大概在6。97μm之间,下表皮细胞横切面形状不规则,与上表皮一样外壁平滑,厚度平均值大概在68。32μm之间,具有角质层但是较薄,平均值大概在6。66μm之间;云锦杜鹃是背腹异面叶,基本薄壁组织都具有栅栏组织和海绵组织,各样地栅栏组织都有3层,厚度平均值大概在157。82μm之间,栅栏组织和海绵组织的细胞排列3个样地都较为紧密,海绵组织的厚度平均值大概在282。32μm之间;栅栏组织与海绵组织厚度之比平均值大概在0。57μm之间;叶片厚度大概在424。29μm之间。叶绿体大量存在于栅栏组织,海绵组织中多分布着含晶细胞。