一年生黑麦草(L. multi florum Lam.)是一种丛生型的冷季型草,具有较强的发芽能力和幼苗生长势[5]。黑麦草生长速度快,再生性强,适应土壤范围广[6]。黑麦草具有品质优和产量高等特点,在世界各地被广泛种植。近年来,随着我国畜牧业的高速发展,黑麦草作为牧草的种植面积越来越大,对畜牧业生产的重要性也日益凸显。
乙烯利,学名2-氯乙基膦酸,分子式:C2H6CIO3P,分子量144.49,是一种低毒植物生长调节剂,广泛应用于果实、蔬菜的催熟,也用于花卉中诱导花芽形成和开花[7]。乙烯利施用在作物上, 能很快地被作物各器官吸收,并在茎、叶、花、果等组织内释放出乙烯,调节作物的代谢、生长和发育[8]。乙烯是植物激素,对植物的生长发育的各个阶段起调节作用。现有研究表明各种胁迫都能引起乙烯生产量的增加[9]。
黑麦草幼苗过氧化物酶(POD)活性,随干旱胁迫时间的延长而增加,且随干旱程度的加重,含量也增加。水分不足固然对黑麦草的生长产生不利。抗氧化酶系统如超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)作为胁迫时的一些生理生化反应的产物,能在一定程度上反应植物的抗淹水胁迫能力[10]。本研究以黑麦草幼苗为材料,采用喷施不同浓度外源乙烯进行处理,通过测定不同处理时期黑麦草的抗氧化酶系统如超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)活动指标及黑麦草幼苗生长情况,观察喷施不同浓度外源乙烯对黑麦草幼苗淹水胁迫的缓解情况,以期探索出能缓解黑麦草淹水胁迫的适宜外源乙烯浓度或浓度范围。 
1    材料与方法
1.1     材料
黑麦草(Annual Ryegrass, 普通四倍体,原产地美国,丹农国际种子公司)
外源乙烯(液体乙烯利,有效成分含量90%,北京索来宝科技有限公司)
1.2     方法
生长指标:测定黑麦草株高和鲜重。
生理生化指标:超氧化物歧化酶(SOD)采用氮蓝四唑(NBT)光化还原法测定[11]。过氧化物酶(POD)采用愈创木酚法[12]。过氧化氢酶(CAT)参照Chance和Maehly方法测定[13]。细胞质膜透性的测定采用相对电导率法[14]。每7天测一次,2016年9月25日播种,2016年10月9日开始测定,2016年11月20日结束。
取Na2HPO4•12H2O71.7g配置成0.2mol/L磷酸氢二钠溶液的A母液,取NaH2PO4•2H2O31.2g配置成0.2mol/L磷酸二氢钠溶液的B母液,分别用蒸馏水定容到1000ml。
分别取A母液228.75ml,B母液21.25ml,用蒸馏水定容到1000ml,加入10gPVP配置成0.05mol/L磷酸缓冲液 PBS。磷酸缓冲液PBS的PH为7.8。
取1.399g Met用磷酸缓冲液PBS(pH7.8)定容到100ml配置成130mmol/L甲硫氨酸溶液。
取0.03721g EDTA-Na2用磷酸缓冲液PBS定容到1000ml配置成100μmol/L EDTA-Na2溶液。
取0.0075g核黄素用蒸馏水定容100ml,并稀释10倍配置成100μM核黄素溶液。
取0.06133g NBT用磷酸缓冲液PBS定容到100ml配置成750μmol/L氮蓝四唑(NBT)溶液。
取50ml 磷酸缓冲液PBS,加入28ul愈创木酚加热搅拌溶解,冷却后加入19μl 30%的H2O2配置成过氧化物酶POD反应液。
取100ml磷酸缓冲液PBS,加入0.1546ml30%的H2O2摇匀配置成过氧化氢酶(CAT)反应液。
所有试剂配置好后均放入低温冰箱中保存。
从对照组和3个实验组分别取3组黑麦草,共12组黑麦草材料,编号。每组大约取3g,放入装有冰袋的保温箱中待用。迅速剪取0.1g黑麦草放入预冷的研钵中,加2ml磷酸缓冲液PBS充分研碎,将研磨好的黑麦草浆液移入2ml的离心管中,放置在冰箱待用。12个组的黑麦草都研磨完毕后,放入事先预冷的离心机中,10000r/min下离心10min,上清液为酶液,待用。
上一篇:水稻籽粒植磷酸积累的氮素调节机制研究
下一篇:拟南芥SEC6基因在主根细胞程序性死亡中的功能初步研究

稻田锌含量对水稻害虫褐...

甲苯二甲苯对斑马鱼幼鱼神经的毒性影响

PEG6000模拟干旱胁迫对大麦...

教育实习前后生物专业师...

小鼠皮层PV+神经元fgfr2敲除对突触蛋白的影响

重金属铬对白尾灰蜻稚虫...

对二甲苯对视顶盖HDAC1蛋白表达的影响

国内外图像分割技术研究现状

公寓空调设计任务书

志愿者活动的调查问卷表

10万元能开儿童乐园吗,我...

神经外科重症监护病房患...

中国学术生态细节考察《...

C#学校科研管理系统的设计

承德市事业单位档案管理...

医院财务风险因素分析及管理措施【2367字】

AT89C52单片机的超声波测距...