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溶藻菌短短芽孢杆菌B15的发酵条件优化(4)
•mL-1
的藻液中,取等量未作处理的藻液
作为对照组,每组平行 3 个,置于光照培养箱中培养 4 天,计数,测量并计算抑藻率,
确定最适温度。
1.2.8.2 培养基初始 pH值
最适温度下按 pH值 5、6、7、8、9 在 200 rpm 的转速下培养 48 h,制备无菌滤液,
按体积比 1%比例加入到 20 mL 起始浓度为 1.0×106
•mL-1
藻液中,取等量未作处理的藻
液作为对照组,每组平行 3 个,置于光照培养箱中培养 4 天,计数,测取抑藻率,确定
最适 pH值。
1.2.8.3 摇床转速
设置转速分别为 50、100、150、200、250 rpm,最适温度下培养 48 h,制备无菌滤
液,按体积比 1%比例加入到 20 mL 起始浓度为 1.0×106
•mL-1
藻液中,取等量未作处理
的藻液作为对照组,每组平行 3 个,置于光照培养箱中培养 4 天,计数,测量并计算抑
藻率,确定最优摇床转速。
1.2.8.4 接种量
按照上述测定的最佳培养温度、培养基初始 pH值和摇床转速下培养 48 h,接种量
分别按 1%、2%、3%、4%、5%,制备无菌滤液,分别加入到 20 mL 起始浓度为1.0×106
•mL-1
藻液中,取等量未作处理的藻液作为对照组,每组平行3 个,置于光照培养箱中
培养 4 天,计数,测量并计算抑藻率,确定最优接种量。
1.2.8.5 装液量
在测定前四者的前提下,装液量分别按 30 mL、40 mL、50 mL、60 mL、70 mL进
行培养,按上一步骤测出的接种量加入到 20mL起始浓度为 1.0×106
•mL-1
藻液中,取等
量未作处理的藻液作为对照组,每组平行 3 个,置于光照培养箱中培养 4 天,计数,测
取抑藻率,确定最佳的装液量。
2 结果与分析
2.1 铜绿微囊藻的培养及计数
通过计数结果绘制铜绿微囊藻的生长曲线,图 1 显示铜绿微囊藻在 0~3天处于迟缓
期;3~18天时处于指数增长期,藻细胞增长迅速,其中 3~12 天增长速度略低于 12~18
天;18 天后长势缓慢,进入稳定期;21 天后藻细胞数逐渐减少,进入衰亡期。
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利用CRISPR/Cas9技术定点突变拟南芥CRWN3基因
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