不同作物秸秆生物炭吸附细菌和铅镉的作用(3)
1．2．2 铅镉对H3菌株的致死浓度
取9只装有5 mL LB液体培养基的试管，分为三组，加入CdCl2母液使三组Cd2+终浓度分别为5 mg/L、7.5 mg/L、10 mg/L。每只试管2%浓度接入H3菌株于摇床震荡培养1天，观察其中H3菌株生长情况。测定24 h后管中Cd2+的浓度，计算H3菌的常态去除率。
重复上述步骤将母液换成Pb（NO3）2，Pb2+终浓度分别为10 mg/L、15 mg/L、20 mg/L。探究合适的Cd2+和Pb2+的浓度。
1．2．3 生物炭对溶液中铅镉的去除作用
取12只摇瓶，每只加入30 mL ，Cd2+浓度为5 mg/L（由CdCl2母液配制）的LB液体培养基。三只摇瓶一组，分为四组。第一组加入400 ℃成炭的稻秆炭，第二组加入600 ℃成炭的稻秆炭，第三组加入400 ℃成炭的玉米秸秆炭，第四组加入600 ℃成炭的玉米秸秆炭。每组第一只摇瓶加入0.2%的生物炭，第二只加入0.02%生物炭，第三只加入0.002%的生物炭，做3个重复，于摇床处理24 h，
将四组摇瓶分别吸取2 mL处理液于2 mL离心管中，10000 r/min离心10分钟。随后用注射器取1.5 mL上清液于7 mL离心管中，在每只7 mL离心管中加入1.5 mL的10%硝酸。配置Cd标准曲线，随后用ICP检测仪检测2组处理液的镉元素剩余浓度。
测量各组摇瓶中剩余处理液在600 nm下的吸光值以及2组处理液的pH。
铅吸附组将摇瓶中培养基替换为Pb2+浓度为10 mg/L（由Pb（NO3）2母液配制）的LB液体培养基，其余的操作与上面镉吸附组的相同。
1．2．4 生物炭协同细菌对溶液中铅镉的去除作用
取12只摇瓶，每只加入30 mL ，Cd2+浓度为5 mg/L（由CdCl2母液配制）的LB液体培养基，每只摇瓶按2 %接H3菌株。三只摇瓶一组，分为四组。第一组加入400 ℃成炭的稻秆炭，第二组加入600 ℃成炭的稻秆炭，第三组加入400 ℃成炭的玉米秸秆炭，第四组加入600 ℃成炭的玉米秸秆炭。每组第一只摇瓶加入0.2%的生物炭，第二只加入0.02%生物炭，第三只加入0.002%的生物炭，做3个重复，摇床处理24 h。
于无菌条件下分别吸取1 mL处理液于无菌水试管中，梯度稀释，接着分别吸取1 mL处理液，无菌漏斗过滤后梯度稀释。
将四组摇瓶分别吸取2 mL处理液于2 mL离心管中，10000 r/min离心10分钟。随后用注射器取1.5 mL上清液于7 mL离心管中，在每只7 mL离心管中加入1.5 mL的10%硝酸，使硝酸终浓度为5%。配置Cd标准曲线，随后用ICP检测仪检测2组处理液的镉元素剩余浓度。
测量各组摇瓶中剩余处理液在600 nm下第十秒的吸光值以及2组处理液的pH。
铅吸附组将摇瓶中培养基替换为Pb2+浓度为10 mg/L（由Pb（NO3）2母液配制）的LB液体培养基，其余的操作与上面镉吸附组的相同。