目前,国内外在鳈属鱼类的分类、分布、食性、饲养驯化等方面进行了零星的报道。宋天祥,马骏对华鳈的繁殖生物学及人工繁殖和早期发育的研究[19-20];李燕,刘智俊等探讨繁殖时间、体质量及催产剂量对华鳈人工繁殖的影响[21];施振宁进行华鳈的驯养与亲本培育试验[22];宣云峰,王荣泉对华鳈驯化养殖试验初探[23];李绍明,梁志强等分析及评价华鳈肌肉营养成分[24]。而在华鳈的遗传结构、系统发生方面则缺乏系统的研究与报道,并且近几年来随着捕捞强度的日益加剧,以及自然资源的污染,人为的破坏,使得华鳈野生资源日益衰减。
1。3 华鳈GHR基因的研究目的与意义文献综述
GHR基因在多种鱼类中已有较多研究报道,并且发现GHR在鱼类的肝、脑、性腺、鳃、肠和肾组织均有表达,而华鳈中GHR基因的研究尚未报道。本研究旨在克隆获得华鳈的GHR基因序列,并与其他鲤科鱼类进行核苷酸序列与氨基酸序列对比,探讨华鳈GHR基因与其他物种的亲缘关系,为华鳈后续生长关联性及生长调控机制的研究奠定基础,从而更好的保护和利用华鳈。
2 材料与方法
2。1 材料、试剂与仪器
(1)材料
华鳈来源于洪泽湖;
(2)试剂
AGAROSE G-10 琼脂糖、LB AMP+ 有氨苄青霉素LB液体培养基、LB AMP- 无氨苄青霉素LB液体培养基、HiFi-Script cDNA第一链合成试剂盒、Gel Extraction Kit快速琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒、大肠杆菌感受态细胞均购自(北京)康为世纪生物科技有限公司、质粒购自Takapa公司;
(3)仪器
VORTEX-5 震荡器、Mini-7k 微型离心机、DYY-6C型电泳仪电源、UVG20 紫外分析仪、Eppendorf单道微量可调移液枪、Gel DocTM EZ Imager凝胶成像系统、ND-2000C微量紫外分光光度计、DK-S24电热恒温水浴锅、SN210C灭菌锅、HPS-160 生化培养箱、 DH6-914385-Ⅲ 电热恒温鼓风干燥箱、IMS-100 全自动雪花制冰机、TGL-16GB 高速台式离心机、BSA124S 电子天平。