摘要:随着转基因技术在全球的推广,对转基因玉米的研究也越来越深入,用农杆菌介导的转基因玉米已取得很大成就,本文对AT59玉米与农杆菌侵染的共培养阶段对改变培养基的成分、培养的温度、培养基的pH等条件进行观察与比较玉米幼胚经过共培养阶段后的存活率和生长状态,从而得出对共培养阶段较好的条件,经过实验数据分析后,发现pH在5。8,培养的温度在22摄氏度时对玉米幼胚共培养最适合,其培养的成分,经过试验发现,培养基中加入MES,使用量为1mg/1L时,对幼胚的生长状态最适宜。95030
毕业论文关键字:玉米共培养 培养基成分 生长条件
Abstract:With the promotion of transgenic technology in the world, the research on transgenic maize is more and more deep, and Agrobacterium tumefaciens-mediated transgenic maize has made great achievements。 In this paper, the co-culture stage of AT59 maize and Agrobacterium tumefaciens The temperature of culture, the pH of culture medium and the pH of culture medium were observed and compared。 The survival rate and growth state of maize immature embryos were observed and compared。 After the analysis of the experimental data, , Found that the pH at 5。8, the incubation temperature at 22 degrees Celsius corn embryo co-culture the most suitable, which co-cultured ingredients, after the experiment found that the medium by adding inositol, the amount of 1mg / 1L, the immature embryo The most appropriate growth status。
Keywords:Corn co - culture Medium composition growth conditions
目录
1 前言 3
1。1 植物组织培养 3
1。2 农杆菌共培养 3
2 材料与方法 3
2。1 实验材料 3
2。2 培养基配方及配置 4
2。3 实验方法 5
2。3。1 实验预处理 5
2。3。2 共培养阶段 5
2。4 单因素实验 6
2。4。1 培养基pH 6
2。4。2 共培养温度 6
2。4。3 MES的使用量 7
3 实验结果及分析 7
3。1 培养基的pH对共培养阶段的影响 7
3。2 共培养温度对幼胚发育的影响 8
3。3 MES的使用量对培养基pH的影响 9
参考文献 13
致 谢 14
1 前言
1。1 植物组织培养
植物组织培养是成立在细胞全能性这个理论基础上的,从理论上讲,只要是有着完整的核和膜系统的活的植物细胞,都可以在适当条件下表现出细胞全能性,但植物细胞所处的环境决定了表达的难易程度。
植物组培是将来自母株的植物细胞、组织或者器官置于人工培养基上培养的技术,无菌是植物组织培养的基本条件,在组培中,只有在植物材料、培养基、培养器皿等均处于无菌条件下,并且通过人为控制温度、光照、湿度和其它条件,才能使植物细胞在离体条件下正常生长发育[1]。
1。2 农杆菌共培养
农杆菌介导的遗传转化方法最初仅适用于双子叶植物,因为人们认为单子叶植物不在农杆菌的宿主范围之内,但随着研究的不断深入,农杆菌介导的单子叶植物的遗传转化也有了进展。单子叶植物能否利用农杆菌进行转化的关键因素有三点:一是农杆菌是否能够吸附在植物细胞表面;二是细胞和组织能否释放酚类化合物等诱导vir基因活化的信号分子;三是将T-DNA运到细胞内部后能否被整合进植物基因组[2]。农杆菌介导法是农杆菌的含T-DNA的Ti质粒将目的基因转移整合到受体细胞中。