1.1.2仪器
冷冻高速离心机(德国Eppendorf 公司, 5810R型),高速匀浆器(德国IKA公司, T10 basic型),水浴锅,凝胶成像仪(美国伯乐公司, Universal Hood II型),水平电泳槽 (北京优尔一仪器厂,型号DYCP-31B),转膜槽(北京优尔一仪器厂,型号DYCP-31B),分光光度计(日本岛津公司,型号UV-2501 PC 型)。
1.1.3实验动物
八周龄的雄性    ICR小鼠40只(国家育种中心分公司,中国上海)。小鼠饲养于恒温恒湿条件下[温度(23°C±1°C)、湿度(60%)],保持正常的进水进食,按12小时制设定光暗交替(光照时间8:30-20:30)。在进行一周的实验室条件驯化后,将小鼠随机分配成四组(每组10只),各组进行如下处理,并连续处理20周:正常对照组(Control): 正常饮食(11.4%脂肪),每日灌胃PSPC的溶剂[0.1% Tween-80 (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA)]。高脂组(HFD): 高脂饮食(60%脂肪),每日灌胃PSPC的溶剂。治疗组(HFD+PSPC): 高脂饮食(60%脂肪),每日灌胃PSPC(700毫克/千克/天)。PSPC组: 正常饮食(11.4%脂肪), 每日灌胃PSPC(700毫克/千克/天)。
1.2 实验方法
1.2.1 小鼠的血清及肝脏组织获取
小鼠眼球取血,冰浴冷凝1小时后离心分离获得血清(3000g,5min)立即实验或-80°C保存。颈椎脱臼法处死小鼠,立刻取肝脏组织并称重。保存于-80°C或直接用于实验。
1.2.2 肝脏组织匀浆的制备
将肝脏组织块按1:5与含有蛋白酶抑制剂的预冷PBS溶液混合,用组织捣碎机研磨(1200R/min)成匀浆后离心(4°C,12000g,20min),取上层清液。
1.2.3 蛋白质含量的测定
参照BCA蛋白浓度测定试剂盒说明书操作,计算样品的蛋白浓度。
1.2.4  ALT的测定
分光光度法测定血清ALT水平,测定方法参照试剂盒说明书(建成生物技术研究所,南京,中国)。活性表示为U/L。
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